PCR试剂盒（教学用）

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应PCR试剂盒（教学用），我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

规格：50T/500T
产地：国产|进口
编号：XH049
品牌：百奥莱博
常规PCR发展到如今已经是非常成熟，对于大多数的科研人员来说，买TAQ酶和dNTP就可以，而如果为省事，可以直接买PCR MasterMix。而本试剂盒从PCR的原理来让学生学会PCR。本试剂盒带有模板和引物，可以产生500bp的单一条带。
试剂盒组成：
试剂盒组成
50次
500次
储存条件
Taq Polymerase(5U/ul)
50ul
500ul
-20℃
10×PCR Buffer
1ml
5ml
-20℃
MgCl2(25mM)
1ml
5ml
-20℃
模板（1ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
上游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
下游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
ddH2O（PCR用）
2ml
25ml
-20℃
6×DNA Lodding Buffer
1ml
1ml
-20℃
500bp对照（50ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
说明书
1份
1份
RT
保存说明：10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O（PCR用）在2-8℃保存一个月对实验无影响，500bp对照、模板和引物在2-8℃保存一周对实验无影响。微量试剂打盖前请离心。
自备试剂：琼脂糖，电泳缓冲液，核酸染料（如EB，goldveiw等）
操作步骤：
按照下面的量加入试剂：可一次配50ul，或者一次配更多的量，如500ul，混匀再分成50ul一管。一般Taq Polymerase最后加入。
加入试剂
加入量总50ul
加入量500ul
ddH2O（PCR用）
37ul
370ul
10×PCR Buffer
5ul
50ul
MgCl2(25mM)
4ul
40ul
模板（1ng/ul）
2ul
20ul
上游引物(10mM)
2ul
20ul
下游引物(10mM)
2ul
20ul
Taq Polymerase(5U/ul)
1ul
10ul
总体积
50ul
500ul
混匀。
按照下面的条件设置反应
温度
时间
循环次数
94℃预变性
3min
1 cycles
94℃变性
30sec
30 cycles
54℃退火
30sec
72℃延伸
500-2000bp/1min
72℃终延伸
5min
1 cycles
反应完降温到25℃
反应完后，取5ul产物，加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混匀电泳检测。可同时在两测跑一个500bp的对照。（1.5%的胶可以得到理想的结果）

更多有关PCR试剂盒（教学用）的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·Pfu DNA Polymerase
编号：XH022
规格：500U/2500U
产品简介：
我们生产的Pfu DNA Ploymerase(高保真TAQ酶)是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。
注意事项：
1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃，有效期12个月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。
3、用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，Tm值在55-80℃之间，引物浓度在0.1-0.5uM之间，比Taq酶略高。

活性定义：
1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。


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