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- 2025年11月22日
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北京鼎国
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DGHZ-300A
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯
击处理将载体 DNA分子导入大肠杆菌细胞中. 实验中使用的主要仪器：电热恒温水槽 超净工作台 台式离心机 电热恒温震荡器 电热恒温培养箱 2 热击 DNA连接 产物与大肠杆菌感受态细胞冰浴30min后,放置42摄氏度水浴锅中,热击90秒,后迅速将大肠杆菌转移到冰水中放置2-3min. 3 大肠杆菌复苏 上步热击后,一般都要对菌体进行一次复苏过程,向热击加入600-800 ul37摄氏度预热的无抗生素LB培养基后,置于摇床上37氏度
化学试剂(如CaCl2)制备的感受态细胞,通过热击处理将载体DNA分子导入大肠杆菌细胞中. 实验中使用的主要仪器：电热恒温水槽 超净工作台 台式离心机 电热恒温震荡器 电热恒温 培养箱 2 热击 DNA连接产物与大肠杆菌 感受态细胞 冰浴30min后,放置42摄氏度水浴锅中,热击90秒,后迅速将大肠杆菌转移到冰水中放置2-3min. 3 大肠杆菌复苏 上步热击后,一般都要对菌体进行一次复苏过程
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