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- 2025年12月19日
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rabbit
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北京鼎国
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文献和实验pull-down实验：是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术。其基本原理是先构建靶蛋白-GST融合蛋白载体，然后进行体外表达及纯化。将得到的靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶）融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，充当一种“诱饵蛋白”，然后将目的蛋白溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的蛋白，将目的蛋白洗脱下来，通过SDS-PAGE电泳及western blot分析证实两种蛋白间的相互作用。 以上三种方法是比较经典的研究筛选和验证蛋白互作关系
Glutathione S-transferase omega 1 (GSTO-1) exists as both a wild-type (wt) and a mutant (mut) enzyme due to a polymorphism in a single amino acid Ala140Asp. (1) The role that this gene product plays in connection with a range of disease
的蛋白或多肽的特殊性质可对目标蛋白进行分离和纯化。用作分离的载体蛋白被称为标签蛋白或标签多肽 (Tag)，常用的有谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferase, GST) 、六聚组氨酸肽(polyHis-6) 、蛋白质 A(protein A)和纤维素结合位点(Cell ulose binding domain)等。 1.1 表达 LacZ 融合蛋白的载体 如 pEX1/2/3 载体(图 3-31)，P R 受 cIts857 控制，宿主 M5219
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