- ￥3870
- Sino Biological
- 10827-H08H
- 2026年01月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
100 µg
蛋白名称：P4HB蛋白, P4HB protein
蛋白构建：A DNA sequence encoding the human PH4B (NP_000909.2) corresponding to amino acid (Met 1-Lys 505) was expressed with a C-terminal polyhistidine tag.
表达宿主：HEK293 Cells
蛋白纯度：> 95 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性：Measured by its ability to promote aggregation of insulin in the presence of DTT. The specific activity is > 7.5 A650/min/mg
蛋白内毒素：< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端：Asp 18
蛋白分子量：The recombinant human PH4B consists of 499 amino acids and has a predicted molecular mass of 56.4 kDa. In SDS-PAGE under reducing conditions, it migrates with an apparent molecular mass of 60 kDa due to glycosylation.
蛋白NP号：NP_000909.2
蛋白氨基酸序列：Met1-Lys505
蛋白标签：C-His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验1. 取保存的重组大肠杆菌菌液 150 微升接种于 30 毫升含相应抗生素的 LB 培养液中，在 100 毫升锥形瓶中，300rpm，37℃ 通气过夜培养。2. 取 16 毫升过夜培养物接种于 800 ml 含相应抗生素的 LB 培养液，在 2L 的锥形瓶中用预实验所确定的最佳诱导温度，300rpm，通气培养 4 小时，至对数生长中期。3. 以预实验确定的最佳 IPTG 浓度，最佳时间和最佳温度诱导表达靶蛋白。4. 收集菌液，4℃，5000 g（5500rpm）离心 15 分钟收集沉淀，－70℃ 保存
信息学的分析方法等。 2.1 酵母双杂交 该系统由Fields 和Song[3]首先在研究真核基因转录调控时建立。利用真核生长转录因子的两个不同的结构域：DNA结合结构域(DNAbinding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)，分别与目标蛋白X 及可能与目标蛋白相互作用的蛋白Y 相连，并共同转入酵母细胞。如果蛋白X与Y能够发生相互作用就能使转录因子原来分开的两部分结合，形成完整的活性形式从而激活下游报告基因。通过检测报告基因的表达产物就可判
)； (7) 重复(1)-(5)步，pH梯度为X-0.6；X-0.3；X；X+0.3；X+0.6；X+1。 (8) 观察胶体金颜色变化直到室温下放置2小时，记录仍保持红色的最低pH。 注意： 1．如胶体金粒子直径较小（3～6nm），加NaCl需放置较长时间（几个甚至十几个小时）后才能观察到颜色变化。必要时可放大反应体积（1 ml胶体金），并借助离心来判断。 2．有些蛋白最佳pH范围较窄，设置的梯度不能太大。 5、最小蛋白浓度的确定 (1) 用0.22 mm微孔滤膜过滤或高速
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