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-20℃
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3年
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Protein AG
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大量
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北京博尔西科技有限公司
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/
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1mg
提示:本公司全部产品均为科研、实验专用试剂,非医疗用途、非药品、非保健品、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!
重组蛋白A蛋白G融合蛋白
(r-PAG)
名称:重组蛋白A蛋白G融合蛋白
英文名称:Recombinant Protein AG(r-PAG)
来源:大肠杆菌
性状:冻干粉
体系:冻干前为5 mM PB、pH7.4
分子量:56.3kDa
等电点(PI):4.74
纯度:≥95%(SDS-PAGE检测)
使用方法:无菌水配制,现用现配
规格:1mg、10mg、100mg、500mg
保存: -20℃
有效期:3年
简介:重组蛋白A蛋白G融合蛋白(r-PAG)融合了8个抗体Fc结合区域,包含金黄色****蛋白A的5个Fc结合域和链球菌蛋白G的3个Fc结合域,去除了蛋白A和蛋白G中的细胞壁结合域、白蛋白结合域和非特异性结合域。同单独的蛋白A或蛋白G相比,其具有更宽广的结合范围,可以同人的所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM相结合,但不能与小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白结合,适合用于鼠IgG单抗的提取和检测。同时融合后的r-PAG降低了对pH的依赖,允许在pH5-8进行结合。
蛋白A、蛋白G、蛋白AG融合蛋白
各物种蛋白IgG亚型结合强度(表)
| 种类 | 亚型 | 蛋白A | 蛋白G | 蛋白AG融合蛋白 |
人 |
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgD IgA Fab |
+++ +++ + +++ + - + + |
+++ +++ +++ +++ - - - + |
+++ +++ +++ +++ + - + + |
小鼠 |
IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM |
+ +++ +++ +++ - |
++ +++ +++ +++ - |
++ +++ +++ +++ - |
大鼠 |
IgG1 IgG2a IgG2b IgG2c |
+ - - +++ |
++ +++ + +++ |
++ +++ + +++ |
| 牛 | IgG1 IgG2 |
+ +++ |
+++ +++ |
+++ +++ |
| 山羊 | IgG1 IgG2 |
+ +++ |
+++ +++ |
+++ +++ |
马 |
IgG(ab) IgG(c) IgG(T) |
+ + - |
- - +++ |
+ + +++ |
| 兔 | IgG | +++ | +++ | +++ |
| 猪 | IgG | +++ | + | +++ |
| 狗 | IgG | +++ | + | +++ |
| 鸡 | IgY | - | - | - |
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文献和实验、Glu、Ser和Thr的区域,且在该区域附近有某些特定的氨基酸,则该蛋白就会不稳定。这些PEST结构域的磷酸化导致钙的结合能力提高,从而利于钙依赖性蛋白酶对蛋白质的降解。这提示可以在缺乏PEST蛋白裂解系统的E.coli中表达PEST富含蛋白。 减少E.coli中重组蛋白裂解的策略有以下几种:(1)将蛋白质靶向细胞周质或培养基[145,186];(2)在较低的温度下培养细菌[187];(3)选用蛋白酶缺陷的菌株[188];(4)构建N-末端或C-末端融合蛋白[186];(5)将目的基因多拷贝串联
细胞蛋白、核蛋白、胞浆蛋白、带化学修饰基团的天然蛋白(例如磷酸化蛋白)中的一种或两种以上作为目标从样品中分离收集的一套试剂。用于液体样品中蛋白浓缩、提取、或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等目的。 蛋白纯化试剂盒用于将连接有Flag标签 GST HIS 标签的重组 蛋白、包涵体蛋白、抗体从重组蛋白表达系统中高效浓缩分离出来。主要原理是利用蛋白A或蛋白G与抗体的不变区有多个结合位点或Ni-Sepharose与HIS标签蛋白在不同缓冲液条件下亲和能力多得多差异分离目标蛋白。将蛋白A与Sepharose共价
只剩下3-4条杂带,这样后续的纯化就很方便了。因为色谱柱的纯化条件比较难optimize。 这段文字可以参考: 用Novagen公司《pET System Manual》提供的方法,分别进行细菌渗透休克,超声波裂解,研究融合蛋白在细胞周质,细胞质和包涵体中的分布。 渗透休克 用1.2.3方法诱导细菌(10ml体积),测菌液OD600,10000 r/min离心0.5 min去上清,加入渗透休克溶液1(V1= OD 600×V2/5,V1为渗透休克溶液1,V2为培养新鲜菌液),冰浴10 min












