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文献和实验出来的.像前面几位战友说的那样,可以考虑加大上样量 2. 是否WB的条件不好? 可以跑其他蛋白的WB看看,如果其他蛋白质都跑出来的很好的话, 可以考虑换个抗体试一试,,但是话说回来,cell signaling的p-AKT 很好的,我也用了好几年.ser473和T308都不错的. 3. 条带弱的话,可以用 can get sinal 去提高抗体的敏感度. BTW, 我自己跑p-akt的时候, 1抗是1:1500 2抗是 1:20000 good luck
(Ser473)(193H12)Rabbit mAb，1:300,稀释，二抗是驴抗兔，1：2000，我是实验室的新手，刚呆俩月，受 此挫折，一头雾水，请过来人或者有经验的同学帮忙解答怎样解决，非常感谢！ 碧峤 pAkt有两个位点，Ser473和Thr308，其中Ser473相对容易显色。如果显色失败，可能的原因:1 上样量过少，我们一般都是30μg；2 一抗孵育时间过短，我们一般24h~48h；3 一抗是否工作有待排除 米宝
：使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。（图 A）使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit，抗体 1:100 稀释；(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒，抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注：使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK （Erk1/2）Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
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