100%酶活性的反应条件
1X 缓冲液Tango™:
33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
保存缓冲液
SgsI保存在:
10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 300 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
连接和重新酶切
50倍SgsI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。
琼脂糖包埋DNA酶切
至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
双酶切
采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。
兼容性末端
MluI, PauI, AflIII (A^CGCGT), BtgI (C^CGCGG)。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。