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SgsI (AscI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1891
  • 2025年10月06日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - 重组酶
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER1891 300 u (5 u/µl) 1.00 ml ER1891
    ER1892 1500 u (5 u/µl) 1.00 ml ER1892
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 37°C 0-20 0-20 0-20 50-100 100 50-100 1X or 2X

    Lambda DNA
    0.7%琼脂糖
    2 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    SgsI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 300 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍SgsI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    MluI, PauI, AflIII (A^CGCGT), BtgI (C^CGCGG)。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 可能重叠 – 不影响。
    CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    Dcm (CCWGG)

    5'...Cm5CW GG CGCGCm5CW GG ...3'
    3'...G GWm5CC GCGCG GWm5CC ...5'

    不阻止酶切
    CpG

    GGCGCGCC

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    2 0 0 0 0 0
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    0 0 0 0 0 0

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    图标文献和实验
    相关实验
    • Hints and precautions for the care, feeding and breeding of Neurospora

      during the extended incubation period. Crosses are made on petri dishes for specific purposes, as when shot asci are to be collected. But plates are more prone to contamination and desiccation than tubes, and less compact for incubation and storage. 2. Media

    • Meiotic Analysis

      Diploid strains of asci, placed on suitable medium, sporulate and form four haploid spores/ascus, which may be arranged as tetrahedra, diamonds, or linearly. Strains forming linear arrays of spores in the ascus are rare, dissection

    • Hints and precautions for the care, feeding and breeding of Neurospora

      with cross tubes because they result in more rapid water loss and are more prone to contamination during the extended incubation period. Crosses are made on petri dishes for specific purposes, as when shot asci are to be collected. But plates are more prone

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