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- Thermo scientific -fermentas
- ER0811
- 2025年09月30日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer R | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER0811 | 300 u (10 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | ER0811 | |
| ER0812 | 1500 u (10 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | ER0812 | |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| R | 37°C | 50-100 | 50-100 | 50-100 | 100 | 50-100 | 100 | 1X or 2X |
Lambda DNA (dam- )
1.4%琼脂糖
116 切割位点
10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
备注
- 底物为λ DNA (dam- ) (#SD0021)。
- 重叠的Dam甲基化抑制MboI酶切。为了避免Dam甲基化的影响，样本DNA需要从dam-, dcm- 菌株中抽提，如GM2163 (#M0099)。
- MboI、Bsp143I和DpnI都识别相同的核苷酸序列，但是这些酶的甲基化敏感性和切割位置不同。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 阻止酶切。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dam (GATC) | Gm6ATC |
阻止酶切 |
| CpG | 5'...m5C G ATm5C G ...3' |
不阻止酶切 |
| EcoBI (TGA(N)8 TGCT) | 5'...TGm6ATC(N)6 TGCT...3' |
阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 50-100 | ||||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 116 | 0 | 7 | 22 | 15 | 15 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 15 | 15 | 15 | 15 | 22 | 15 |
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文献和实验Mesoplasma florum:Inverse PCR Transposon location
Choice of Enzyme Hutchison used DraI as a cutter, but this is a blunt cutter, making religation difficult MboI cuts at GATC sites, and is insensitive to 5-me dCTP methylation (sensitive to methylation of A) MboI cutting
相关专题 限制性核酸内切酶产品选择专题 一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株(品系)。例如，从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶 称为Bam H，在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶，可以编成不同的号，如HindII、HindIII，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。 限制性内切酶(restriction
化酶的菌株中分离而得，并且其甲基化识别位点与内切酶识别位点有重叠，那么该限制性内切酶的部分或全部酶切位点有可能不被切割。例如，从Dam+ E.coli 中分离的质粒DNA完全不能被识别序列为GATC的MboI所切割。 E.coli 菌株中的DNA甲基化程度并不完全相同。pBR3 2 2DNA能被完全修饰
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