100%酶活性的反应条件
1X 缓冲液G:
10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
保存缓冲液
Hin1I保存在:
10 mM磷酸钾 (pH 7.4, 25°C), 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.2 mg/ml BSA和50% �v/v)甘油。
连接和重新酶切
50倍Hin1I过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。
琼脂糖包埋DNA酶切
至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。
备注
重叠的Dcm甲基化影响Hin1I酶切。为了避免Dcm甲基化的影响,样本DNA需从dam-, dcm-菌株中抽提,如GM2163 (#M0099)。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
双酶切
采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。
兼容性末端
Bsp119I, Bsu15I, Hin6I, HpaII, MaeII, MspI, NarI, Psp1406I, SsiI, TaqI, XmiI。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 部分影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。