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PyroStart™ Fast PCR Master Mix

(2X)
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  • Thermo scientific -fermentas
  • K0211
  • 2025年10月14日
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    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    Water, nuclease-free
    K0211 2 x 1.25 ml (for 250 react. of 20 µl) 2 x 1.25 ml K0211
    Features

    • 快速 一 缩短PCR时间,任何PCR仪扩增最低只需18分钟。
    • 热启动PCR 一 高特异性和灵敏度扩增。
    • 使用方便 一 室温配制反应体系。
    • Master Mix 形式 一 减少加样错误和污染风险。
    • 高效 一 可扩增长达4 kb基因组DNA。
    • 扩增产物具有3’-dA突出末端。
    Applications

    • 高通量PCR。
    • 特异性扩增复杂cDNA和基因组模板。
    • 扩增低拷贝DNA模板。
    • RT-PCR。
    • 克隆PCR。
    • TA克隆。
    说明
    PyroStart™ Fast PCR Master Mix (2X)是设计用于快速、高灵敏度和高重复性PCR 的产品。该酶是热启动Taq DNA Polymerase的改进版(快速反应),修改热循环参数可节省约1.5 小时,总的PCR时间只需 约18分钟(见图1)。时间缩短可极大地增加高通量筛选和其它应用的PCR仪使用效率。Master Mix 提供的2X浓缩液含有热启动Taq DNA Polymerase、dNTPs和其它必需的PCR组分(DNA模板和引物除 外)。Master Mix形式可以节约反应体系配制时间,降低污染的可能性。PyroStart™ Fast PCR Master Mix (2X) 适合所有的热循环仪。

    质量控制
    相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染。功能测试:扩增人基因组DNA的单拷贝基因。


    图1。快速PCR与常规PCR对比。
    PyroStart™ Fast PCR Master Mix (2X) 可节约大约1.5小时,PCR总需时可缩至18分钟。
    图2。PyroStart™ Fast PCR Master Mix (2X)催化快速扩增不同长度和GC含量的DNA片段。
    GeneAmp® 9700 PCR仪扩增5 ng人的基因组DNA ( 35个循环) 。
    M – GeneRuler™ Express DNA Ladder
    图3。扩增503 bp GAPDH目标基因只需18分钟。
    PyroStart™ Fast PCR Master Mix (2X) 扩增人DNA的目标基因序列( GeneAmp® 9700仪) 。热循环扩增条件95°C, 60 s;95°C, 0 s, 65°C, 0 s; 25 cycles; 72°C, 10 s.
    M – FastRuler™ Low Range DNA Ladder
    1-3 – PCR 产物

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      这两个条件我们才可以选择快速反应模式。而 Standard Mode 和 Fast Mode 的主要区别在于不同模式下仪器升降温速率不同,快速模式下升降温速度更快。下图列举了当前部分用于基因表达和基因分型的 Master Mix 所支持的反应模式,供大家参考(图 4)。另外针对当前使用较为广泛的体外诊断试剂盒,如新冠检测试剂盒,大家在运行模式选择时需要根据试剂盒说明书做相应的设置,保证实验设置与试剂盒说明书一致。 图 4 常见基因表达和基因分型 master mix 支持反应模式整理

    • Worm PCR

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