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KIRGEN秉承“致力于改善人类健康并持续为客户创造更多价值”的企业宗旨,专注于改进实验室条件,提高实验和检测的质量与速度,推进高质量科学研究和临床检验。产品被广泛应用于生命科学研究机构、医疗机构、临床实验室、工业单位等。
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文献和实验、在立体显微镜下,可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体,并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后,将微量离心管垂直放置在管架上 10min,此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清,控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻,添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml),Noggin (终浓度100
细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当抗体,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 1 h。 加入 0.9 ml 的蛋白质 A-Sepharose 悬液,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 30 min。 用含 900 mmol/L NaCl 的 NETN 洗蛋白 A-Sepharose 混合物,再重复洗 5 次。最后,用 NETN 洗
板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下,用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体,并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min,必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl 含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中,轻轻吹打混匀,迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl 混合液,放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后,加入 0.5ml hLOs
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