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上海瑶韵
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KIRGEN秉承“致力于改善人类健康并持续为客户创造更多价值”的企业宗旨,专注于改进实验室条件,提高实验和检测的质量与速度,推进高质量科学研究和临床检验。产品被广泛应用于生命科学研究机构、医疗机构、临床实验室、工业单位等。
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文献和实验细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心,3000g,15min; 3.离心后样本(有略微沉淀) 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层; 震荡混匀; 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上,离心 10000g,60min; 6.离心后的样本(沉淀明显,沉淀中富含外泌体) 将上清吸出留下沉淀,将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液; 7.加 PBS 重悬沉淀; 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
的E.coli 接种于30-50ml LB/抗生素培养液中,37°C搖床培养12~16 h; 2. 取30-50ml的菌液,室温下3,500-5,000xg离心10min收集细菌。 3. 倒弃培养基。加入2.5ml Solution I/RNaseA混和液,漩涡振荡使细胞完全悬浮。 4. 往重悬混和液中加入2.5ml Solution Ii,轻轻颠倒混匀7-10次后可将混合液室温放置2min以提高产量。避免剧烈混和裂解液且裂解反应不要超过5 min。
(2)抑制酶活性:加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到离心管内,充分搅拌,然后离心,倾去上清液,得到沉淀物。 (3)脱糖:加80%乙醇10mL 到离心管中,充分搅拌以洗涤沉淀物(每次都用同一玻棒),离心,倾去下清液。重复洗涤数次以去除可溶性糖分。 2. 溶提淀粉 (1)加醋酸-氯化钙:先用醋酸氯化钙溶液约10mL 加到装有脱脂样品的离心管中,搅拌后全部倾入250mL 三角瓶内,再用醋酸氯化钙溶液50mL 分数次洗涤离心管,洗涤液并入三角瓶内,搅拌玻棒
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