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- 2026年01月09日
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- 文献和实验
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应用：
- 通用膜
- 可看到活细胞的生长
- 大多数分子通过单细胞层的运输，分泌和扩散
- 免疫化学染色
- 药物生物药效率测定
- 一般情况下，这是最大的孔径，防止细胞通过孔径迁移。
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文献和实验葡萄糖，溶于100 mL无Ca2+、Mg2+的0.01mol/LPBS（pH值为7.4）溶液，用0.22μm微孔滤膜滤菌]，38℃±1℃消化，消化过程中不断震荡，10分钟后吸出上面酶液弃去，用无菌D-Hanks液将组织块清洗2~3次，加入新鲜酶液继续消化，重复上述步骤。此时组织块边缘模糊，再将组织块浸入消化酶液中，38℃±1℃消化10分钟，将消化酶液与组织块分开，组织块重新加入新鲜消化酶液进行消化；而原消化酶液1500rpm离心10分钟，取沉淀即为消化下的细胞，重新用无菌D-Hanks悬浮，离心
素工作液；DAB工作液（武汉博士德公司）显色，自来水终止反应；脱水，透明，D·P·X封片保存。 2 结果 2.1 形态学观察结果 组织块24ｈ开始贴壁，48～72ｈ可见神经组织边缘游出少量细胞，主要为圆形或梭形（图1）。8～9d左右，细胞基本铺满培养孔。此时改用无血清条件培养基培养进行纯化。培养过程中，部分细胞死亡。12d左右获得的细胞胞体基本为呈圆形或多角型，直径约6～10μm。细胞核较大，胞质少（图2）。 2.2 免疫组织化学染色结果 培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色GC蛋白
X100（30% Triton X100＋0. 01 MPBS 100 Ml）30 Min. 以增加细胞的通透性. 0. 01 MPBS清洗5 Min×3； 3. 5%小牛血清封闭1 h0. 01 MPBS清洗5 Min×3； 3. 加入用血清稀释液（牛血清白蛋白 1. 00 g＋0. 01 MPBS 100 Ml)稀释的一抗. 4 ℃存放24-48 h；吸去抗体. 0. 01 MPBS洗5 Min×3； 4. 加入配好
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