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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
SDS-PAGE Gel Kit 6%
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
50T/125T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥160.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 125T | 产品价格: | ¥320.0 |
产品简介:
本产品提供了上层胶(浓缩胶)和下层胶(分离胶)的预混溶液,配胶过程按照1:1混合,无需稀释;无需压胶操作,可快速灌制多块凝胶。所配的上层胶呈现红色,点样孔清晰易辨,方便点样。红色染料不影响电泳、染色及转膜等后续实验。
本产品配套提供的促凝剂, 实验员配胶过程中不用接触TEMED, 避免异味。
本产品采用Tris glycine凝胶体系,使用时仅需自备制胶器具和蒸馏水。
成品凝胶配合我司超快电泳缓冲液(EZB2006)和荧光上样缓冲液(PFS001-RP),可在半个小时内完成样品处理、电泳、拍照的全部过程,获得理想的电泳结果。
本产品配制的凝胶也可用于非变性Native PAGE凝胶电泳(不含SDS)。
浓度:6%, 8%, 10%, 12%, 15%。
| 成品胶厚度 | 0.75mm | 1.0mm | 1.5mm |
| 可制胶数量(50T) | 50片(10*8cm) | 40片(10*8cm) | 25片(10*8cm) |
| 可制胶数量(125T) | 125片(10*8cm) | 110片(10*8cm) | 70片(10*8cm) |
| 具体可以配制的凝胶数量与凝胶厚薄、大小有关。 | |||
产品组成:
| 编号 | 名称 | 规格(50T) | 规格(125T) | 存储 |
| 试剂A | 上层胶溶液(2X) | 35ml | 80ml | 4℃ |
| 试剂B | 上层胶缓冲液(2X) | 35ml | 80ml | 4℃ |
| 试剂C | 下层胶溶液(2X) | 100ml | 2*125ml | 4℃ |
| 试剂D | 下层胶缓冲液(2X) | 100ml | 2*125ml | 4℃ |
| 试剂E | PAGE胶促凝剂 | 5ml | 8ml | -20℃ |
保存条件:
注意事项:
制胶步骤说明:
1.配制下层胶(分离胶)(试剂C和试剂D,1:1混合)
参考下表,取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液,混匀;在下层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的PAGE胶改良型促凝剂。适当混匀后倒入到制胶模具中。
2.配制上层胶(浓缩胶)(试剂A和试剂B,1:1混合)
单片胶配制配方(10*8cm)
| 凝胶厚度 | 下层胶配方 | 上层胶配方 | ||||
| 下层胶溶液 | 下层胶缓冲液 | 促凝剂 | 上层胶溶液 | 上层胶缓冲液 | 促凝剂 | |
| 0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40μl | 0.75ml | 0.75ml | 15μl |
| 1.00mm | 2.7ml | 2.7ml | 60μl | 1ml | 1ml | 20μl |
| 1.50mm | 4.0ml | 4.0ml | 80μl | 15ml | 1.5ml | 30μl |
由于染料的特殊理化性质,试剂B底部有沉淀属于正常情况,使用前请摇匀
不同制胶器材体积会有误差, 以上数值仅供参考。
3.保存配制好的凝胶
我们推荐现配现用。 制备好的凝胶如要长时间保存, 请浸没在凝胶保存液(GP016),密封,保持湿润, 放置在阴凉背光处。 室温下可以保存3个月。在4℃条件下可以保存1年。
凝胶长期保存,应注意:
跑胶说明:
电泳条件:180 V, 使用传统tris gly电泳缓冲液,60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。如使用我司超快电泳缓冲液(Cat.#:EZB2006)可以在20分钟内完成电泳。
凝胶浓度选择参考
根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,如果蛋白分布广,建议试用梯度预制胶。
| 分离胶浓度 | 6% | 8% | 10% | 12% | 15% |
| 最佳分离范围 | 50-150kD | 30-90kD | 20-80kD | 12-60kD | 10-40kD |
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文献和实验不完全,若存在,需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 (5)抗原修复不完全:对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。 (6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应:可加入组织透化步骤,进行细胞膜或核膜的透化。 (7)试剂盒保存不当:请于 4℃ 进行保存,勿室温防止过长时间。 (8)封闭时间过长:若使用封闭液进行封闭,请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2:免疫组化染色弱怎么办? (1)抗体浓度过低,孵育时间过短:可提高抗体浓度,进行抗体4℃过夜孵育。 (2)组织
的实验包括外泌体分离、透射电镜(TEM)、纳米颗粒检测(NTA)、BCA、WB。 (二)实验结果如下: 外泌体分离方法:此处步骤比较长,内容篇幅有限,暂且省略步骤,如有需要,可在微信公众号下面留言。 透射电镜拍摄:先制片,再拍摄。制片是先将外泌体固定在铜网上,再用 2% 醋酸双氧铀染色液染色,随后放于灯下烤 10 min,再拍照。 从上面的图片中可以看出,超离法相比较两种试剂盒的分离效果,纯度较高,电镜图片更清晰。 纳米颗粒大小检测:将外泌体样本进行稀释并检测,仪器自动出
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前













