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文献和实验oil,incubate 15 – 18 hrs IEF (1D)17cm pH 4-7 BioRad Step 1 250V 1 hr linear Step 2 10000V 2 hrs linear Step 3 10000V 45000 VH rapid Place strips face up in equilibration tray and freeze in -70℃ Equilibrate strips 1 x 10min 375mM Tris-HCl pH
Protocol for mRNA amplification--RT-PCR实验过程
well. Transfer contents of in vitro transcription mix to 1.5mL RNase/DNase-free tube. Add 330 uL of RLT mix. (stopping point �80 overnight) Add 250ul 95% Ethanol and mix well by pipetting. (Do not spin here!) Apply sample (700ul) to RNeasy mini
构建 ① 设定温度梯度(26-35°C)和时间梯度(12-72 h),对龙须菜进行高温胁迫。 ② 提取龙须菜总RNA(RNA提取按照Qiagen试剂盒说明书进行,RNeasy Plant Mini Kit,Qiagen)。 ③ 应用SMART技术构建龙须菜高温胁迫表达cDNA文库,3’和5’引物分别加接酶切位点。 4.文库筛选载体构建 将龙须菜高温胁迫表达文库cDNA双酶切,连入同样双酶切的AD 克隆质粒pGADT7中,用PEG/LiAc 转化
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