- ￥3000
- iCell（赛百慷）
- 上海
- iCell-006a
- 2026年04月30日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SK-BR-3-luc
- 库存：
100
- 供应商：
镜像绮点
- 肿瘤类型：
乳腺腺癌
- 细胞类型：
-
- ATCC Number：
-
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
乳腺
- 相关疾病：
乳腺腺癌
- 物种来源：
组织
- 免疫类型：
否
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
-
- 器官来源：
乳腺组织
- 运输方式：
冻存/复苏
- 年限：
长期
- 生长状态：
贴壁培养
- 规格：
T25
细胞介绍
1970年G. Trempe 和 L.J. Old从胸水中建立了这株细胞。没有病毒颗粒。超微结构特征包括微丝和桥粒，肝糖原颗粒，大溶酶体，成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞特性
1） 来源：器官：乳腺；乳房 疾病：腺癌 取材转移灶：胸水
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x106 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
细胞筛选
该细胞为稳定转染Luc的细胞，随细胞传代次数的增加，其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备McCOY's 5A(iCell-0011 含NaHCO3 2.2g/L)或DMEM（推荐iCell-128-0001含NaHCO3 1.5g/L；)培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 注意:该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/L NaHCO3）培养基培养细胞时需要提高CO2浓度（7%-10%）。复苏初期细胞贴壁不牢，会有悬浮细胞出现，在传代和换液时注意回收（1000rpm 5min）悬浮的细胞。细胞生长融合到80%以后会有悬浮细胞出现。
3） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
4） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1） 冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞，传代可以参考以下方法：
1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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