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大量
- 供应商:
上海希言科学仪器有限公司
- 现货状态:
现货
- 保修期:
三年
- 规格:
细胞刮,柄长18厘米,刮片长1.8厘米,一次性使用,聚乙烯,独立包装,伽马射线消毒
细胞刮
- 品牌:BIOLOGIX
- 货号:70-1180/70-1250
- 材质:医疗级聚乙烯
- 柄长:18cm 25cm
- 灭菌:伽马射线灭菌
产品特点:
● 医疗级聚乙烯材质,高韧性,减少细胞损伤;
● 柄长提供18cm 和25cm 选择,刮头宽16.68mm,可灵活转动,便于刮取大范围细胞;
● 伽马射线灭菌,无致热源;
● 独立纸塑包装,使用安全方便。
订购信息| 产品型号 | 柄长 | 灭菌 | 包装方式 | 包装规格 |
| 70-1180 | 18cm | 是 | 独立包装 | 100个/箱 |
| 70-1250 | 25cm | 是 | 独立包装 | 200个/箱 |
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文献和实验。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿(1*107-5*107 个细胞/皿)。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中,使其终浓度为0.75%,然后在室温缓慢旋转10分钟,使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中,并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS,将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g
buffer煮沸10 min,-70 ℃保存长时间保存,如果短期内做可以-20保存。这就是我的磷酸化蛋白处理过程,供参考。我不是很赞同sandy99战友的“反复冻融”的观点,个人认为这样蛋白容易降解。DXY网友syo820924回复:DXY721 的意见不错,我在做磷酸化AKT,也是处理2 min后立即要收细胞,我是倒掉培养液后直接加裂解液到培养瓶然后用细胞刮刮下来然后在冰上裂解30 min.关于sunyuxiaoxi 的问题,我觉得还先把蛋白提出来放-80℃比较合适,这样对实验结果的影响会小些吧。
冰上,用冰冷的 PBS 洗涤细胞。2. 吸出 PBS,然后加入冰冷的裂解缓冲液(每 107 细胞/100 mm 培养皿/150 cm2 培养瓶加入 1 ml;每 5×106 细胞/60 mm 培养皿/75 cm2 培养瓶加入 0.5 ml)。3. 用预冷的塑料细胞刮棒刮下贴壁细胞,然后轻轻地将细胞悬浮液转移至预冷的微量离心管中。4. 在 4 ℃ 下持续搅拌 30 分钟。5. 在 4 ℃ 预冷的离心机中以 16000 × g 的转速离心 20 分钟。6. 轻轻地从离心机中取出离心管,置于冰上。将上清














