免疫组化

免疫组化
免疫学基本原理.通过标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分别进行组织和细胞原位检测，从而进行定位、定性及相对定量的研究。

实验意义
1.免疫组织化学可应用于恶性肿瘤的病理诊断和科研工作。2.可与组织化学染色方法的形态学诊断相结合, 提高疑难肿瘤的鉴别诊断的准确率.并为肿瘤进行进一步的病理分型。3.指导和提供临床治疗方案的选择。

实验步骤
1.石蜡切片免疫组化:①67°C烘箱烘片2小时,常规脱蜡至水.用pH 7.4的PBS冲洗三次。每次3 min ;②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min ,蒸馏水冲洗三次。PBS冲洗三次,每次3 min;③3%H202室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性, PBS冲洗三次，每次3 min ;④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭.室温孵育10 min ,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗。37*C孵育1-2 h或者4°C孵育过夜;⑤PBS冲洗三次,每次3 min ;滴加稀释至适当比例的带标记:二抗.379C孵育10~30 min , PBS冲洗三次,每次3 min ;⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液. 379C孵育10-30 min, PBS冲洗三次。每次3 min;⑦显色剂显色.自来水充分冲洗,复染细胞核,酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。2冰冻切片免疫组化:
①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片.厚度为5~6 μm ;
②载玻片可不打底,裱片后立刻用电吹风吹干;
③染色前需用冷*酮4°C固定10-20 min :
④PBS洗2次，每次5 min ; .
⑤3%H202灭活内源性过氧化物酶20 min ,需遍光处理;
⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似,最后脱水透明封片进行观察。
结果展示：



实验完成周期及交付标准：
1.实验周期; 1-2周
2.交付标准：
1、原始定性、定位结果图片；
2、详细实验报告，含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
3、每个样品可提供（3张，200X光镜照片），具体照片倍数可根据客户要求而定

需确认的信息：
1.样本的种属?
2.样本类型
3.检测的目的蛋白
4.是否提供一抗（一抗如果公司抗体库里有该指标抗体，则可共享）
5.阳性率或者半定量分析要求
6.拍照要求

收费标准：

细胞平台	行为学检测	动物模型
原代细胞制备与培养	水迷宫检测	慢性胰腺炎模型
细胞培养、传代	十字架	肝纤维化模型
原代细胞传代培养		非酒精性脂肪肝
细胞系STR鉴定服务	动物模型	骨质疏松模型
细胞转染	小/大鼠饲养	糖尿病模型
MTT细胞增殖、活性、毒性检测	小/大鼠灌胃	眼外伤模型
CCK8细胞增殖、活性、毒性检测	兔子饲养费	青光眼模型
流式细胞凋亡检测	大鼠灌胃	烧烫伤模型
流式细胞周期检测	小鼠灌胃	短肠模型
血管形成实验（非钙染/钙染）	兔子灌胃	肾衰模型
ROS检测	腹腔/肌肉给药（大小鼠）	肾炎模型
划痕实验	腹腔/肌肉给药（兔子）	尿路结石
克隆形成实验	尿液/粪便采集	高氧/低氧损伤模型
粘附实验	血液采集
transwell实验（迁移）	TTC染色	病理平台
transwell实验（侵袭）	超声检测	组织包埋
贴壁/悬浮细胞转细胞株构建	血常规检测	冰冻/石蜡切片
耐药细胞株筛选构建	DR检测	HE染色
	骨组织切片	其他特殊染色
分子平台	microCT	全扫描拍照
载体构建	皮下瘤模型	扫描电镜
细胞/组织/血液RNA提取	移植瘤模型	透射电镜
mRNA/miRNA等引物设计	原位瘤模型	共聚焦拍照
RT-qPCR检测	心肌缺血再灌注模型
CHIP检测	门静脉高压动物模型
EMSA检测	高血压动物模型
双荧光素酶实验	心肌梗死动物模型
原位杂交	动脉粥样硬化动物模型
	脑缺血再灌注
免疫平台	肾性高血压模型
蛋白（核/膜/总）提取	主动脉弓狭窄模型
蛋白含量测定	脊髓损伤模型
Western Blot检测	背根神经节损伤模型
COIP	脑瘫模型
免疫组化/荧光	癫痫模型
	抑郁症模型
行为学检测	肾脏缺血再灌注模型
水迷宫检测	关节炎
十字架	肺气肿模型

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