(3β,6α,16β,20R,24S)-3-O-[(3,4-

v468 chapter 5 糖原合成酶激酶-3 的抑制

at 10, 25, and 50 μM). At 24 h post-treatment, celllysates were obtained; SDS-PAGE and Western blotting were performed as described in Section 3, Methods. AR-A014418dose-dependent decreases of phospho-β-catenin (Ser33/37) and phospho-glycogen synthase

利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化

的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说，我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析，随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13，24，25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基：含 100 μg/ml 氨苄青霉素，15 μg/ml 卡那霉素，2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷（IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液：300 mmol

基于极性与非极性氨基酸的“二元组图” 进行蛋白质设计

性，而 β 股（β-strand ) 具有交替周期性（图 9.1)。因此，设计为双亲性 α 螺旋的二元组图序列应该在第三或第四位放上非极性氨基酸。相对应，设计一个双亲性 β 股应该在序列中交替安插极性和非极性氨基酸残基。在 “二元码” 策略中，蛋白质侧链的精确三维堆积并不需要预先确定。因此，在一个二元组图序列库中，每一个极性和非极性残基的侧链可以变化得非常剧烈，从而产生巨大的组合多样性。 二元组图蛋白质的组合库是由合成基因的组合库表达出来的。每个基因编码一个不同的氨基酸序列，但是在同一个给定组合库