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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
请置于阴凉干燥处保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
mEC+n Broth
- 库存:
100
- 供应商:
青岛海博生物
- 规格:
10袋/盒
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文献和实验菌种接种于 500 mL LB 培养液 (含用于筛选的抗生素) 中,37 ℃ 以 225 rpm 速度振荡培养 12~16 小时;2. 10,000 rpm,4 ℃ 离心 15 min 收集菌体;3. 将细菌悬浮于 100 mL 预冷的 STE(0.1M NaCl,10 mM Tris.Cl,pH8.0,1 mM EDTA,pH8.0)中,12,000rpm 离心收集菌体;4. 将菌体悬于 10 mL 细菌悬浮液中,再移至 50 mL 离心管中;5. 加入 1 mL 用 10 mM Tris.Cl (pH
(一)分离培养方法Uu在含95% 氮气和5%CO2 环境中生长良好。其生长最适pH为5.5-6.5,最适温度为36℃-37℃。Uu具有尿素酶,能分解尿素产氨,使含酚红指示剂的Uu液体培养基pH值上升,颜色由黄色变为红色。再将液体培养物转种到Uu固体培养基上,能生长成具特征性油煎蛋样集落。(1 )液体培养基:支原体肉汤培养基80mL,马血清或小牛血清10mL,酵母浸液10mL, 10 %尿素溶液0.5mL-1.5mL, 0.4%酚红溶液0.5mL,青霉素(使其在培养基中的浓度为500U/mL
,加入无菌试管中,将主平板或冷冻保存的菌株培养物接种于营养肉汤培养基内,37 ℃ 振荡(100 次/min)培养 10 h。该菌株培养物应每毫升不少于 1~2×109 活菌数。11.2 平板掺入法 实验时,将含 0.5 mmol/L 组氨酸 -0.5 mmol/L 生物素溶液的顶层琼脂培养基 2.0 mL 分装于试管中,45 ℃ 水浴中保温,然后每管依次加入试验菌株增菌液 0.1 mL,受试物溶液 0.1 mL 和 S9 混合液 0.5 mL(需代谢活化时),充分混匀,迅速倾入底层琼脂
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