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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Grancalcin (GCA)
- 库存:
1000
- 供应商:
上海信裕
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 18.6kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Met1~Val139 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in PBS, pH7.4, containing 5% trehalose, 0.01% sarcosyl. |
MAYPGYGGGF GNFSIQVPGM QMGQPVPETG PAILLDGYSG PAYSDTYSSA GDSVYTYFSA VAGQDGEVDA EELQRCLTQS GINGTYSPFS LETCRIMIAM LDRDHTGKMG FNAFKELWAA LNAWKENFMT VDQDGSGTV
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验一、原核蛋白表达及纯化 1、怎样提高E.coli中6′His标签蛋白的表达水平? 6 × His标签蛋白的表达水平低原因可能为:目标蛋白有毒或不稳定,或者是细菌生长过程中不能维持表达结构。有时候,插入片段的5’端序列编码了干扰转录或翻译的元件(比如有反向重复序列而形成茎环结构,掩盖了Shine-Dalgarno序列),在这种情况下,有必要检查和修改表达序列。改变培养基和宿主菌也可能会有所帮助。 外源性蛋白的表达会使宿主菌生长迟缓。高速的转录、翻译重组蛋白所需要的代谢消耗,导致宿主菌生长
重组蛋白所需要的代谢消耗,导致宿主菌生长的缓慢。低浓度下即影响宿主菌生长的基因产物被认为‘有毒’,这样的产物包括细胞膜蛋白或与DNA相互作用或干扰电子传递的蛋白。为了降低有毒蛋白在被诱导前对宿主菌生长的影响,在无诱导的时候的基础转录水平越低越好,并且诱导前的细菌传代数要控制在最小范围。细菌生长过程中质粒的丢失有时候可以通过在培养基中加入高浓度的ampicillin (200ug/ml) 或carbenicillin (50ug/ml)得到解决。对于一些不稳定的表达结构,应当避免过夜培养起始菌。先
致对不同目的蛋白的活性影响不同,所以昆虫表达系统还可作为一个研究糖基化对蛋白质结构与功能影响方面的理想模型。 ③表达水平高:与其它真核表达系统相比较,此系统最突出的特点就是能获得重组蛋白高水平的表达,最高可使目的蛋白的量达到细胞总蛋白的50%。 ④能容纳大分子的插入片段:杆状病毒毒粒可以扩大,并能包装大的基因片段,但目前尚不知杆状病毒所能容纳的外源基因长度的上限。 ⑤能同时表达多个基因:杆状病毒表达系统具有在同一细胞内同时表达多个基因的能力。既可采用不同的重组病毒同时感染细胞的形式,也可在同一
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