
【动物】转基因动物基因型鉴定
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- 2025年07月13日
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动物实验
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广州永诺生物科技有限公司
技术原理
分别设计两组不同的PCR引物,用于扩增野生型小鼠和突变型小鼠的基因组DNA片段。用于扩增野生型基因组DNA的PCR两个引物至少有一个来自于被剔除的区域DNA序列。这样对于基因剔除小鼠纯合子个体基因组DNA。利用这对引物将无法得到扩增产物;用于扩增突变型小鼠基因组DNA。我们一般在被剔除片段的两端设计PCR引物。由于被剔除的片段大多有成百上千个碱基。这样通过PCR产物大小可以明显区分突变型小鼠和野生型小鼠来源的DNA片段(野生型小鼠相应片段常常由于过长而不被扩增)。一般来说。用于基因型鉴定的PCR产物大多在300-800bp左右。 最好能将野生型基因鉴定PCR产物大小和突变型基因鉴定PCR产物大小分开。这样在观察电泳结果时可以一目了然。
实验步骤
实验室基因工程小鼠品系的保存大多是通过和野生型小鼠交配, 然后不断鉴定、选择携带基因突变或转基因的后代来实现。因此,维持一个基因工程小鼠品系。 必须要通过分子生物学手段不断的鉴定小鼠的基因型。
送样要求
小鼠尾巴:0.5cm以上;
细胞:3x106;
动物组织:50mg
客户提供信息
目的基因GenBank号码或基因序列、相关动物基因信息
提供结果
含原始结果图的实验报告
实例结果
【以上实例结果均为永诺生物自主实验整理所得,请勿随意盗用,更多资讯欢迎致电020-84298069】
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文献和实验动物产生过度摄食、肥胖,直至产生DM。 五、转基因糖尿病动物模型 转基因动物技术是通过遗传工程的手段对动物基因组的结构或组成进行人为的修饰或改造,并通过相应的动物育种技术使得这些经修饰改造后的基因组在世代间得以传递和表现。 利用这一技术,人们可以在动物基因组的特定位点引入所设计的基因突变,模拟造成人类遗传性疾病的基因结构或数量异常。可以通过对基因结构进行修饰,在动物发生、发育的全过程中研究体内基因的功能及其结构功能的关系。有关 1 型、2 型 DM 和青少年发病的成人型糖尿病(maturity
大量自身抗体,Korganow AS[14]等将 K/BxN 小鼠血清转移到 B 细胞缺陷型K/BxN -μmol·L-1/小鼠,2d 内出现严重的关节肿胀等炎症症状,这种也称为 K/BxN 血清转移关节炎(K/BxN STA)模型。 除此之外其他的转基因 RA 模型还有 SKG 小鼠模型、IL-1 受体拮抗剂敲除小鼠模型、human/SCID 嵌合体小鼠模型等等。 随着对类风湿性关节炎研究的不断深入,关节炎动物模型也从诱导型关节炎发展至转基因型关节炎模型,对这些模型的研究都为 RA 的发病
基因的功能,而且可进行工程动物的大量生产。 Gorden 等报道了显微注射法用于转基因小鼠的制备。本法是最早,且应用成功率较高的一种转基因方法。其基本步骤如下: 1.同步获得供体雌鼠(注射激素的雌鼠与正常雄鼠交配而得)和假孕受体母鼠(正常雌鼠与结扎雄鼠交配产生)。 2.供体鼠注射绒毛膜促性腺激素后,采集清晰的原核受精卵。 3. 用显微注射法将纯化的外源基因注射进受精卵的原核内。 4. 受精卵鉴定 ,将存活受精卵或存活胚胎移植到同步交配的假孕母鼠的输卵管(或子宫)内,饲养后鉴定是否受孕以及个体发育状况
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