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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
PeproTech(派普泰克)
- 检测范围:
无
- 检测方法:
酶标仪
- 应用:
ELISA(仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)
- 标记物:
无
- 样本:
细胞培养上清、血浆、血清
Rat IFN-γ Mini ABTS ELISA Development Kit
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文献和实验) ,再与 HRP 标记的 γ 干扰素 (IFN-γ) 受体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 γ 干扰素 (IFN-γ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠 γ 干扰素 (IFN-γ) 含量。 试剂盒组成 : 试剂盒组成
气泡。加样时间宜控制在10分钟内。 洗涤:甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350 μL,浸泡1-2分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤3次。提示:此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。 HRP酶结合物:每孔加酶结合物工作液100 μL,混匀,加上覆膜,37℃孵育30分钟。 洗涤:弃去孔内液体,洗板5次,方法同步骤2。 底物:每孔加底物溶液(TMB)90 μL,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短
。显色的程度通过ELISA酶标检测仪测定光密度(OD:optical density)记录。通过细胞因子的标准蛋白做已知浓度系列稀释,测出OD值后绘制出标准曲线,根据标准曲线可推算出标本中细胞因子的含量,一般使用计算机软件可以很快得到结果(博士德网站有下载)有两种设定空白对照的方案:(1)将TMB空白显色孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后,在坐标纸上画出曲线,以吸光值作为纵坐标,以浓度作为横坐标。(2)将零孔设为对照。得到的数据可以直接在坐标纸上画出曲线。12. 根据样品的吸光
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