多聚赖氨酸（10×，做原位杂交时用DEPC水稀释）

附录二　原位杂交组织化学常用试剂及处理

网络     附录二　原位杂交组织化学常用 试剂 及处理 一、杂交前准备 （一）DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。 　　DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中，所有液体试剂都应

原位杂交组织化学常用试剂及处理

，固定效果下降，建议尽早使用。 　　附：固定液用PBS的配制： 　　配法：按上述比例称取试剂，溶于DEPC水（也可用蒸馏水加DEPC）500～800ml中，过滤后，加水定容至1000ml，高压灭菌。通常配制成10×PBS的储备液，2×PBS和1×PBS可用DEPC水稀释获得。 　　除用DEPC水配制PFA外，也有用灭菌蒸馏水或经DEPC处理的0.01～0.1mol/L的PBS配制的，方法及注意事项同上。 　　4% PFA是目前原位杂交组织化学技术中最常

RNA的定量和完整性分析

电泳缓冲液4μl，甲醛 3.5μl，甲酰胺10μl，加入无菌离心管中混合，95℃水浴变性2min(或55℃,15min)，取出后放入冰中冷却。2） 加入2μl无菌的DEPC处理的加样运载液。(使用加样运载液的目的有三: 增大样品密度, 以确保DNA均匀进入样品孔内; 使样品呈现颜色, 便于加样操作; 能明确显现样品在电泳胶上的泳动位置. 以 0.5 X TBE作电泳液时, 溴苯酚在琼脂糖中的泳动速率与长 300 bp 的双链线状DNA相同 , 而二甲苯氰FF 的泳动速率与长 4kb 的双链线状DNA相同