Folin-酚蛋白定量试剂盒 FLF01鼎国

Folin—酚试剂的配制
1．Folin—酚试剂甲
溶液 I：
2g 无水碳酸钠溶于 100ml0.2mol/l 氢yang化钠中（已配制成 5X），用时稀释需 5 倍。
溶液Ⅱ：
0.5g 五水硫酸铜溶于 100ml1%酒石酸钾钠（或酒石酸钠）溶液。 将稀释后的溶液 I 与溶液Ⅱ，以 50：1 的比例混合。混合后即为 Folin—酚试剂甲，此试剂只能 用一天，过期失效。

2．Folin—酚试剂乙
原液浓度为 2moL/L 使用前需稀释一倍，用多少稀释多少，使其最后浓度为 1moL/L，此为 Folin— 酚试剂乙应用液。
Folin—酚试剂乙原液平时应密封贮存于 4℃冰箱中避光保存。

3．操作方法 标准曲线的制作 取 14 支试管分成两组，按下表顺序加入试剂，混匀，于室温放置 10 分钟。再加入 0.5 毫升试 剂乙，立即摇匀，在室温放置 30 分钟，然后于 500nm 处比色。测定光密度值。取两组测定的平均值， 以蛋白质浓度为横座标，光密度值为纵座标，绘制标准曲线为定量的依据。

样品测定：
（1）取 1 毫升样品溶液（约含 20-250 微克多肽或蛋白质）加入 5 毫升试剂甲混匀，于室温放 置 10 分钟。
（2）加入 0.5 毫升试剂乙（Folin—酚），立即摇匀，于室温保温 30 分钟；然后 500nm 处比色， 以 1 毫升水代替样品作空白对照。测定后，可以从标准曲线中查出未知样品浓度。

若用 0.5 厘米光程的比色杯进行比色，可按下面方法进行操作：取 0.2 毫升样品溶液（约含 5-100 微克多肽或蛋白质），加入 1 毫升试剂甲（可选用 0.3-0.5 厘米直径的小试管）混匀，10 分钟以后， 再加入 0.1 毫升试剂乙，立即混匀，30 分钟后比色，一般来说，若多肽或蛋白质浓度在 2-25 微克， 则采用波长 755nm,而 25 微克以上则采用 500nm 比色为宜。