荧光素-5-马来酰亚胺

荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用

过的分子是抗体，经常使用标记过的抗体来检测特定的目标分子。可在多种检测系统中使用荧光标记来实现灵敏和定量的检测。经常使用具有化学反应活性的荧光基团衍生物来实现荧光标记。通常的反应活性基团包括与氨基反应的异硫氰酸酯衍生物，如FITC和TRITC(荧光素和罗丹明的衍生物);和氨基反应的琥珀酰亚胺酯，如NHS-荧光素或NHS-罗丹明;以及和巯基反应的马来酰亚胺活化的荧光素，如荧光素-5-马来酰亚胺。这些具有反应活性的染料与其他分子进行反应会在荧光基团和标记的分子之间形成稳定的共价键。长久以来一直将异硫氰酸

生物发光 bioluminescence

最大波长，海萤为 460 毫微米，发光细菌为 490 毫微米，萤虫为 544-582 毫微米，萤虫的发光颜色有赖于荧光素酶。生物发光的一般特点是冷光（萤的发光效率为 88 ％，光度 10 -5 烛），而不伴有热线辐射或产热。发光性物质多为细胞内的发光颗粒；夜光虫和萤虫是发光颗粒在细胞内发射的，称此为细胞内发光；而海萤是将分泌物放出体外后再发光，称为细胞外发光。发光通常是发光细胞或发光腺的细胞对刺激的反应，萤虫的发光器、海仙人掌的等受刺激发光时，伴有电的变化，可描记出电发光曲线

滚动式循环放大法IHC增敏方法

5,-PCGCATGTCCTATCCTCAGCTGACAGAACTCACCTGTTAGACGCCACCAGCTCCAACTGTAAGATCGCTTAT-3,3. 带有标记物的互补检测用寡核甘酸5,-XACTGTGAAGATCGCTTATX-3,（X=生物素），或用5,-FACTCTGAAGATCGCTTATF-3,（F=荧光素）；或用5,-HRPACTGTGAAGATCGCTTAT HRP-3,（HRP=辣根过氧化物酶）。（二）寡核苷酸与抗体的结合连接用的抗体可以是特异性一抗，也可以是第二抗体或其他的连接二抗，如抗地高辛（Dig）、抗荧光素（FITC）或抗生物素（biotin）二抗。1. 抗体的脱盐和活化首先对抗体免疫球蛋白进行脱盐，然后进