
即用型免疫组化二抗试剂盒(鼠兔通用型)
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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现货
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- 保质期:
2-8°C保存。每个组分至少可以保存12个月
- 保存条件:
2-8°C保存。每个组分至少可以保存12个月。
- 规格:
5mL
包装:5ml(可用于50张片子)
适用:一抗来源于小鼠或兔子
显色底物:DAB
试剂组成:
| 组分名称 | 规格 | 数量 |
| 内源性过氧化物酶封闭剂 | 5ml | 1 |
| HRP酶标抗小鼠&兔二抗聚合物 | 5ml | 1 |
| DAB底物(20×) | 0.25ml | 1 |
| DAB稀释液 | 5ml | 1 |
| 苏木素 | 5ml | 1 |
未提供但必需试剂:一抗(来源于小鼠或兔子)、5% 山羊血清(abs933)、PBST
本试剂盒是基于聚合物技术的一代免疫组化二抗非生物素检测系统,信号更强、操作更加简单。 与传统的免疫组化二抗试剂盒相比,具有3个特点:一是由于聚合物的独到之处,使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度敏感性,有效减少了一抗使用量,一抗试剂可再稀释2-4倍;二是由于避免了生物素的使用,从而可以避免由于生物素引起的非特异性背景显色,得到更清晰的显色和更干净的背景;三是快速,更短的试剂孵育时间。
储存及有效期
2-8°C保存。每个组分至少可以保存12个月。
操作步骤:
说明:所有的步骤在室温下操作,加试剂可以直接滴瓶滴定,也可以用移液器,一滴=30-40ul
1. 脱蜡、水化组织切片;
2. PBST洗2-3次各5分钟;
3. 根据所应用的一抗的特殊要求,对组织切片进行预处理(抗原修复);
4. PBST洗2-3次各5分钟;
5. 加入100ul 内源性过氧化物酶封闭剂 孵育10分钟,阻断内源性过氧化物酶,以减少非特异性背景染色;
6. PBST洗2-3次各5分钟;
7. 加入100ul 5%至10%正常山羊血清室温孵育封闭20分钟,如一抗使用含有5%至10%正常山羊血清的缓冲液中稀释,则此步骤可以省略;
8. PBST洗2-3次各5分钟;
9. 加一抗,室温或37℃孵育30分钟;
10. PBST洗2-3次各5分钟;
11. 加入100ul HRP酶标抗小鼠&兔二抗聚合物 孵育30分钟 注意:此液对光敏感,注意避光;
12. PBST洗2-3次各5分钟;
13. 使用新鲜配制的DAB显色液(用DAB稀释液稀释DAB底物得到,现配现用),室温孵育5分钟(时间可根据显色情况适当调节),自来水冲洗玻片;
14. 加入100ul苏木素, 孵育3分钟(时间可根据显色情况适当调节),自来水冲洗返蓝;
15. 脱水,透明,封片。
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文献和实验- Bioactive glass ions hydrogels with antiinflammation antioxidant capacity for treating inflammation-related diseasesWenguang Liu, Mi Chen, Meng Luo, Ting Li, Chaoyan Hu, Chenxi Xie, Sihua Li, Tongtong Leng, Jing Tian, Peng Xu, Bo Lei
MATERIALS & DESIGN. 2023 Feb 04 .
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- IRF1/ZNF350/GPX4-mediated ferroptosis of renal tubular epithelial cells promote chronic renal allograft interstitial fibrosisYao Zhang, Jianjian Zhang, Dengyuan Feng, Hai Zhou, Zeping Gui, Ming Zheng, Zhou Hang, Zijie Wang, Zengjun Wang, Min Gu, Ruoyun Tan
FREE RADICAL BIOLOGY AND MEDICINE. 2022 Nov 07 .
影响因子: 8.101
位。 IF(免疫荧光检测)是采用荧光素标记物作为探针,形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,受激发光的照射后发出一定波长的荧光,从而对细胞、组织中的抗原进行定位或定量。 表 1 IHC/ICC与IF特点对比 IHC/ICC 与 IF 染色中使用的抗体主要为一抗与二抗,根据是否选用二抗以及二抗标记物类型可形成多种不同的检测系统。信号放大是免疫组化实验中的重要步骤,信号放大可以使目标蛋白质的信号从微弱到明显,从而更容易被观察和定量。现有的信号放大技术多为链霉亲和素-生物素法,该方法基于链酶亲和
保护抗原和固定组织作用,过氧化氢孵育时间过长易引起脱片;现用现配,配好后4 ℃避光保存。不过,现在已有"第二代即用型免疫组化试剂盒"避免内源性生物素的干扰,推荐使用。 7)血清封闭 组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。一般室温 10-30 min。但也要防止封闭过度 8)一抗和二抗
与其他免疫组化染色基本相似,有良好的可操作性。尽管SABC法操作简便,敏感性强,但是,在操作中仍然要遵循一定的原则,才能得到可信度高的结果。我所做的是《……》(题目略去,是2003年获国家自然科学基金专项基金项目,批准号:302400**)的动物实验部分。其中,需要利用抗β1-integrin观察深Ⅱ度烫伤大鼠局部在微电流治疗后β1-integrin的分布情况。应用的方法就是SABC法,试剂盒(即用型)来自博士德公司(不是为该公司做广告)。下面就按照实验步骤,谈一下我的一些体会。1、载玻片防脱片剂处理











