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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃保存
- 保质期:
有效期5年
- 英文名:
DEAE Agarose 6FF
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
25mL(20540ES25)/100 mL(20540ES60)/500mL(20540ES76)
| 规格: | 25mL(20540ES25) | 产品价格: | ¥300.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 mL(20540ES60) | 产品价格: | ¥788.00 |
| 规格: | 500mL(20540ES76) | 产品价格: | ¥3600.00 |
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
本品DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品离子交换基团-N+(C2H5)2H。
产品性质

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基质(Matrix) |
高度交联的6%琼脂糖微球 |
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粒径(Bead size) |
45-165 µm |
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离子交换类型(Type) |
弱阴离子 |
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载量(Capacity) |
~0.11-0.16 mmol Cl-/mL 基质 |
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流速(Flow Rate) |
300-700 cm/h |
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pH范围(pH Range) |
2-12(长期)/ 2-14(短期) |
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储存缓冲液(Buffer) |
20%乙醇 |
运输和保存方法
冰袋运输。4-30℃保存,有效期5年。
使用方法
1 缓冲液的准备
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。
2 样品准备
样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3 装柱(使用储液器装填)
1)用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2 cm的去离子水。
2)将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。
3)如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。
4)打开层析柱底部出口,开起泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速, 这样可避免液压对所形成柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用你所使用泵的最大流速, 这样也可以得到一个很好的装填效果(【注】在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%)。当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。
5)关闭泵,关闭层析柱出口。
6)如果使用储液器,去除储液器,将分配器至于层析柱中。
7)将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。
8)将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。
4 样品纯化
1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)将样品加到平衡好的DEAE Agarose 6FF中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。
3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。
5 SDS-PAGE 检测
将得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。
6 填料清洗
离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。
CIP(Cleaning In Place)清洗
离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
1)去除一些沉淀或变性物质
用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
3)去除一些离子键结合物质
用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。
注意事项
1)请勿冷冻保存本产品。
2)填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
附表 问题及解决方案
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问题 |
可能原因 |
推荐解决方案 |
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柱子反压过高 |
填料被堵塞 |
按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。 |
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样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。 | ||
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洗脱样品较杂 |
树脂重复多次使用 |
按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。 |
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平衡不充分 |
增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。 |
HB220629
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- 内容
- 询问日期
文献和实验DNA Isolation from Agarose Gels with DEAE Paper
with the voltage increased to 100-120 V. The DEAE paper is removed and binding of the DNA checked by viewing the paper with long wave UV light.The paper is then placed in an eppendorf tube containing 500 μl NET buffer to wash away remaining agarose.The bound DNA
DEAE-纤维素 DEAE cellulose 为二乙氨乙基纤维素。是阴离子交换纤维素之一。
Contributor: Suprya Jayadev Date: April 11,1996 1)Weigh out the appropriate amount of DEAE sephadex and place in a 15 ml conical tube. 2)Wash resin three to four times with zenopure water.Mix gel with water by repeated inversion,then centrifuge
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