APC anti-human CD193 (CCR3)流式标

流式课堂 | 易被忽略的 CD4、CD8 共表达细胞——胸腺淋巴细胞

做过流式实验的同学，对 CD4、CD8 这两个指标都不会陌生。检测 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞分型，是流式中最常见的实验之一。 通常，我们会先检测 CD3，来圈总T淋巴细胞，再分别用 CD4 抗体和 CD8 抗体，来区分 CD4+ T 淋巴细胞（辅助或调节性T细胞）和 CD8+ T 淋巴细胞（细胞毒性 T 细胞）。 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的 CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC 三色流式实验结果。从图中可以看出，在新生小鼠脾脏中，绝大

流式课堂 | 流式对照设置之同型对照

#01 什么是同型对照？ 同型对照（Isotype Control），是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度，但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照？ 流式抗体与靶标的结合，是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞（除T细胞外）表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体，这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合，出现非特异

流式实验如何配色？

一致。 第四步、了解荧光素的强度。 下表列出了常见荧光素的强度： 在已确定 Marker 的强弱，和流式细胞仪可检测的荧光素的强弱后，我们要遵循「强弱搭配原则」，进行配色。 强表达抗原，可以选择弱荧光素，也可以选择强荧光素。 如下图所示，强表达抗原 CD3，选择弱荧光素 FITC 或强荧光素 APC，对实验结果影响不大。 弱表达抗原，一定要选择强荧光素。 如下图所示，弱表达的抗原 CD25，选择弱荧光素 PerCP，会导致阴阳性细胞群分不开。如果选择强荧