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50 Tests
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文献和实验(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
Anti-GFP/BrdU In Situ Immunostaining
Materials 24 well dishes Millicell 0.4 µm inserts (Millipore PICM01250) - coated with fibronectin Culture medium PBS Fixative: 4% paraformaldehyde in PBS (pH 7.6) Rabbit anti-GFP (Molecular Probes, A-11122) FITC-goat anti-rabbit
FITC荧光二抗?――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光
光探针。它还能标记抗体,可用于免疫组织化学单染或多重染色。FITC荧光二抗 主要优点是人眼对黄绿色较为敏感,通常切片标本中的绿色荧光少于红色。缺点是在光照下 易淬灭,易受自发荧光影响。实际上,FITC荧光二抗 的最大缺点是淬灭快,因此要和抗淬灭剂一起使用。DyLight 488则完全不一样,如右图所示,不同荧光团在含有抗淬灭剂(90%甘油的PBS)里的荧光淬灭情况,由图可见。FITC的淬灭最快,Cy2其次,而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光稳定性。因此DyLigt非常适合荧
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