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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Sus scrofa; Porcine (Pig)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Platelet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB)
- 抗体名:
血小板衍生生长因子B(PDGFB)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验,并创造出巨大的社会效益和经济效益。随着人类全基因组的破译,相信抗体技术将会有更广阔应用前景。 抗体的类型主要有: 1.多克隆抗体 主要是将有效抗原注入人体或动物,由人或动物体内的B细胞产生抗体。由此产生的抗体是针对多种抗原决定簇的混合抗体,故称之为多克隆抗体。此技术经过长期实践已经发展的相当成熟,在免疫学诊断中的应用也相当广泛。 2、单克隆抗体 杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。脾
R&D Systems 适用于神经细胞培养的无血清培养基添加剂
)的培养基中对大鼠皮层神经干细胞(目录号NSc001)进行7天的体外培养和分化。(a) 利用神经元特异的小鼠β-iii微管蛋白单克隆抗体(克隆tuJ-1)(目录号MaB1195),以及Northernlights 557结合的驴抗小鼠二抗(目录号 Nl007;黄色)检测分化神经元中的β-iii微管蛋白。(B) 利用绵羊抗人/大鼠gFaP抗原亲和纯化的多克隆抗体(目录号aF2594),以及Northernlights 557结合的驴抗绵羊二抗(目录号Nl010;黄色)检测分化的星形胶质细胞中的gFaP
移植已被用于治疗由于先天胸腺发育不良的免疫缺陷患者。 (二)单克隆抗体与导向药物 1.单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)抗体作为免疫治疗的生物制剂,在临床应用已有一个世纪。长期以来,抗体主要来自于经抗原免疫的异种劝物(如马)的血清。由于一种抗原(如细菌)有多个不同的抗原决定基,每一个抗原决定基都可以被一个B细胞克隆所识别,并产生出针对它的抗体,因此这种异种免疫血清中含明的抗体是多克隆抗体(polyclonalantibody)。多克隆抗体的一个
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