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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至 -80℃
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Canis familiaris; Canine (Dog)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL)
- 抗体名:
中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 酶联免疫 分析 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,尿液及相关液体样本中 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 人 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 水平。用纯化的 人 NGAL 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 人中性粒细胞
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)是Kjeldsen等人于1993年在中性粒细胞的特殊颗粒中首先发现的。以往的研究表明NGAL与炎症、胚胎发育、免疫应答、趋化作用、信号转导以及多种肿瘤的发生与发展等过程密切相关。NGAL在乳腺癌、食管癌、结直肠癌、胃癌、慢性粒细胞性白血病等细胞系中均过表达,并在癌细胞的浸润与不良分化中发挥重要的作用。进一步研究证实,NGAL是存在于中性粒细胞和某些上皮
NGAL(中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白)作为肾损伤的标志物最近成为热点。但是,像许多其他内源性生物标志物分子一样,它不是由一种细胞类型产生的,不同组织中的不同病理都会引起反应。应考虑到不同病人的并存条件解析结果,对这个灵敏的生物标志物做出最佳利用。 从我在CLI的简短介绍文章之后,关于NGAL作为肾损伤早期标志物的性能的研究没有停止。关于NGAL的论文出现速度是每周超过2篇,主要强调的是其肾脏作用。这并不是说这个有趣的分子的其他方面被忽略了
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