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细胞色素P450氧化还原酶(CPR)多克隆抗体

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  • ¥650 - 1800
  • KALANG/进口品牌
  • 中国/美国
  • kl312Ra01
  • 2025年07月14日
  • WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
  • Rabbit,兔
  • Rattus norvegicus (Rat)
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 免疫原

      见说明书

    • 亚型

      见说明书

    • 形态

      粉末/液体

    • 保存条件

      -20oC 至 -80oC

    • 克隆性

      Polyclonal

    • 标记物

      未标记

    • 适应物种

      Rattus norvegicus (Rat)

    • 宿主

      Rabbit,兔

    • 应用范围

      WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA

    • 浓度

      200ug/ml

    • 靶点

      见说明书

    • 抗体英文名

      Polyclonal Antibody to Cytochrome P450 Reductase (CPR)

    • 抗体名

      细胞色素P450氧化还原酶(CPR)多克隆抗体

    • 规格

      100ug/200ug

    多克隆抗体的制备
    www.klbscience.com
    多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)是指用含有多个抗原决定簇的抗原免疫动物后刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体,得到的免疫血清含有多种抗体。多克隆抗体可应用于WB、IHC、Elisa、IP等实验中,是生物医学研究领域不可或缺的研究伙伴。下面我们会来介绍一下多克隆抗体的制备过程。
    1. 免疫原的制备
    普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
    小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
    2. 免疫动物
    选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
    初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
    3. 免疫血清的收集
    一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
    4. 免疫血清的纯化与鉴定
    得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
    5. 免疫血清的保存
    建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
    由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 多克隆抗体的制备方法

      法等都可以),总之就是越简单越好。洗脱过程尽里在低温完成,洗脱下的组分应该在冰盒上放置,洗脱下来后的成份应该立即调节pH至中性,调节pH应该使用缓冲液,而不应该直接使用强酸或强碱,Na2HPO4、Na2CO3和Tris等缓冲液是用来作为中和液的不错选择。需要指出的是,如果需要将抗体进行偶联荧光素或者的时候,就不能使用Tris作为中和液,否则会影响后面的边接效率。 8.  抗体的保存 抗体纯化完后,必须采取合适的保存,否则很容易就失去活性。 总的来说有这么几个方面需要注意:

    • 抗体选择

      实验,请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。   (4)样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。   (5)单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免

    • 新型抗体

      酶催化反应速度比非催化反应快104~108倍,有的反应速度已接近于天然酶促反应速度;抗体酶还具有与天然相近的米氏方程动力学及pH依赖性等。   抗体酶可催化多种化学反应,包括酯水解、酰胺水解、酰基转移、光诱导反应、氧化还原分应、金属螯合反应等。其中有的反应过去根本不存在一种 生物 催化剂能催化它们进行,甚至可以使热力学上无法进行的反应得以进行。   将抗体转变为主要通过诱导法、引入法、拷贝法三种途径。诱导法是利用反应过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体,筛选出具高催化

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