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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至-80℃
- 克隆性:
见说明书
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Homo sapiens (Hukl)
- 宿主:
Mouse小鼠,Human人,Rat大鼠、、、、、
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
500ug/ml
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Carboxypeptidase Z (CPZ)
- 抗体名:
羧肽酶Z(CPZ)单克隆抗体
- 规格:
200ug/200ug/200ug/200ug
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
www.klbscience.com
单克隆抗体制备的基本过程如下:
(1)用抗原免疫小鼠;
(2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
(3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
(4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
(5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后,一般有两种方法来获得单克隆抗体:小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
(1)小鼠腹水:
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔,杂交瘤在腹腔内增殖,取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作,重复性高,且花费少,得到的抗体量多,但伤害动物,而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
(2)细胞培养:
将杂交瘤细胞进行培养,培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多,因为细胞上清含有培养液,pH指示剂,细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确,可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之,单克隆抗体的高特异性,重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而,要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件,否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验糖醛酸苷酸、β内酰胺酶、碱性磷酸酶、青霉素V或G酰胺酶、羧基酞酶、胞嘧啶脱氨酶和胸腺嘧啶核苷酶等。这个策略可以克服几个有关抗体-药物、抗体-毒素相偶联的局限,比如:药物低效能、在肿瘤组织中的不对称分布、内在化的需要、抗原异质性等。目前此研究国外正处于发展与完善阶段,国内也已有报道。如用前体药物甲氨喋呤-α-苯丙氨酸和甲氨喋呤-α-精氨酸联合抗人精浆蛋白单克隆抗体-羧肽酶A偶联物对前列腺癌荷瘤裸鼠模型进行肿瘤生长抑制及药物动力学的观察发现,ADEPT治疗组肿瘤生长明显抑制,裸鼠生存时间延长,生活质量优于单用MTX组
,室温搅拌下逐滴加入正辛酸33ul/ml腹水. (3) 室温混合30min. (4) 4度静置2小时以上,使其充分沉淀. (5) 4度 离心12000 rpm,30min,弃沉淀. (6) 上清于50倍体积的0.01M PH7.4 PBS中,4℃透析过夜. (7) 在透析后的上清中加入等体积饱和硫酸铵溶液. (8) 4度静置1小时以上. (9) z, o4度 离心10000 rpm,30min,弃上清. (10) 沉淀用适量含137mM NaCl,2.6mM KCl
(一) 原理 125I标记的单克隆抗体能与具有相应抗原的细胞结合,犜Z有数百倍以上未标记的特异性抗体同时存在的条件下,则标记抗体的结合受到竞争性抑制。根据不同稀释度抗体分别与相同数量细胞结合后所测得的特异性计数值,可以计算出每个细胞表面的平均抗原密度以及抗原和抗体的亲和力。 (二) 操作步骤 硅化规格相同的5ml玻璃管,双蒸水冲净后烤干, 每次实验分6~12组
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