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- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至-80℃
- 克隆性:
见说明书
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Rattus norvegicus (Rat)
- 宿主:
Mouse小鼠,Human人,Rat大鼠、、、、、
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
500ug/ml
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte klrophage (GMCSF)
- 抗体名:
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)单克隆抗体
- 规格:
200ug/200ug/200ug/200ug
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
www.klbscience.com
单克隆抗体制备的基本过程如下:
(1)用抗原免疫小鼠;
(2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
(3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
(4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
(5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后,一般有两种方法来获得单克隆抗体:小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
(1)小鼠腹水:
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔,杂交瘤在腹腔内增殖,取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作,重复性高,且花费少,得到的抗体量多,但伤害动物,而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
(2)细胞培养:
将杂交瘤细胞进行培养,培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多,因为细胞上清含有培养液,pH指示剂,细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确,可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之,单克隆抗体的高特异性,重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而,要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件,否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验显微镜观察,可见2~5个粘连骨髓瘤细胞,常有融合的巨细胞或哑铃状的细胞。一次融合成功的杂交瘤细胞生长情况大致如下: 第1~2天,各培养孔中肿瘤细胞锐减,残存的瘤细胞成黯黑或折光性差,在巨噬细胞周围聚有破碎细胞,偶见单个、数个透亮的类似骨髓瘤细胞,尚难判定是残留的瘤细胞或是早期的融合细胞。 第3~4天,瘤细胞几乎完全消失,滋养细胞生长活跃,其中央有少数形似骨髓瘤细胞,浑圆透亮,成葡萄串状分布,少则3~5个,多则10余个,其细胞数与日俱增。 第5~6天,小融合细胞集落继续长大
细胞促进其他细胞增殖的机制尚不明了,一般认为它们可能释放非种属特异性的生长刺激因子,为杂交瘤细胞提供必要的生长条件;也可能是为了满足新生杂交瘤细胞对细胞密度的依赖性。 常用的饲养细胞有胸腺细胞、正常脾细胞和腹腔巨噬细胞。其中以小鼠腹腔巨噬细胞的来源及制备较为方便,且有吞噬清除死亡细胞及其碎片的作用,因此使用最为普遍。其制备方法如下: 按上述采小鼠脾细胞的方法将小鼠致死、体表消毒和固定后,用消毒剪镊从后腹掀起腹部皮肤,暴露腹膜。用酒精棉球擦拭腹膜消毒。用注射器注射10ml不完
性免疫应答的诱导与调节中起着关键的作用。 第一节 单核吞噬细胞系统 一、单核吞噬细胞系统细胞的来源与分化发育 MPS细胞起源于骨髓,其分化与更新受细胞因子复杂网络的调控。在某些细胞因子,如多集落刺激因子(multi-colony stimulating factor,multi-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-CSF,GM-CSF)等的刺激下,骨髓中的髓样干细胞经原单核细胞(monoblast)、前单核细胞(pre-monocyte)分化发育为单核
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