- ¥2000 - 5000
- 全国
- 蛋白质串联质谱鉴定
- 2025年07月15日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
LC-MSMS质谱鉴定
- 提供商：
上海维基生物科技有限公司
- 规格：
1H-4H
蛋白质全谱鉴定
Shotgun
1、技术简介
蛋白质（Protein）是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物细胞，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。现代研究结果发现越来越多的多肽同蛋白质一样具有生物功能，建立具有特殊、高效的生物功能肽的肽库是现在的研究热点之一。因此需要高效率、高灵敏度的肽和蛋白质序列测定方法支持这些研究的进行。现有的肽和蛋白质测序方法包括N末端序列测定的化学方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化学降解法等，这些方法都存在一些缺陷。例如作为肽和蛋白质序列测定标准方法的N末端氨基酸苯异硫氰酸酯 PITC分析法，测序速度较慢，通量低；样品用量较大，对样品纯度要求很高；对于修饰氨基酸残基往往会错误识别等。C末端化学降解测序法则由于无法找到PITC这样理想的化学探针，其发展仍面临着很大的困难。在这种背景下，质谱（Mass spectrometer）由于很高的灵敏度、准确性、易操作性、快速性及较好的普适性而倍受科学家的广泛注意。
2、技术原理
蛋白质的一级结构式氨基酸序列，通过鉴定氨基酸序列来匹配它的蛋白质，这是定性研究，是蛋白质组学研究的基础。现在蛋白质组学基本研究手段是：以生物质谱技术为核心，对蛋白质进行大规模、高通量分离、鉴定和分析。以生物质谱为基础的蛋白质组学分析方法主要有Bottom-up（自下而上）和Top-down（自上而下）两种方法。Bottom-up是一种传统的方法，即我们俗称的“鸟枪法”蛋白质组学（Shotgun proteomics），该技术将蛋白质的大片段混合物酶解成小片段的肽段后再进行分析，是蛋白质组学的研究中较为广泛使用的一种质谱技术。Top-down技术可以直接对完整的蛋白质——包括翻译后修饰蛋白质（PTM）以及其他一些大片段蛋白质测序，但是由于不能将完整蛋白质片段分离技术与串联质谱技术相整合而无法开展大规模的蛋白质组学研究。鸟枪法(Shotgun)蛋白质组学是基于质谱的蛋白质组学的典型实验策略。通常情况下，样品经过裂解液提取获得蛋白质混合物（Proteins），蛋白质经过酶解（一般为胰蛋白酶）而形成肽段（Peptides），肽段经高效液相色谱（HPLC，一般按照疏水性进行分离）之后进入质谱（Mass spectrometer）。肽段进入质谱后，先在离子源（Ion source）中进行电离，电离后的分子因接受了过多的能量会进一步碎裂成较小质量的多种碎片离子和中性粒子。它们在加速电场作用下获取具有相同能量的平均动能而进入质量分析器（Mass analyzer）。质量分析器是将同时进入其中的不同质量的离子，按质荷比离子依次进入离子检测器（Ion detector），采集放大离子信号，经计算机处理，绘制成质谱图（Mass spectrum）（图2）。最后将从质谱获得的数据通过分析软件与蛋白质数据库进行比对，获得原始样品中肽段和蛋白质的序列信息。
3、技术特点
- 灵敏度高，可为亚微克级样品提供信息
- 适用范围广，可与色谱连用，对大规模复杂生物样本进行蛋白质的鉴定
- 通量高，一次实验可完成对成千上万个蛋白的定性
- 快速，自动化程度高
- 质谱较难维护，成本较高
4、技术流程图
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
Velos质谱仪，以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪，结合 Nano-LC高通量液相色谱技术，能够对SDS-PAGE蛋白条带、2D蛋白胶点等样品中的蛋白质进行高效精准鉴定。胶条、胶点蛋白质谱鉴定服务可保证100%的鉴定率，否则不收任何费用。 文献参考：Protein identification methods in proteomics. Electrophoresis, 2000.
Hormone Analysis in Food Products
The administration of growth-promoting compounds, to food producing animals is banned within the European Union. We developed several methods whereby the cleanup is based on LLE and SPE and detection based on GC–MSMS or LC–MSMS
可以迅速锁定几个样品间的差异蛋白质。同时，采用SWATH采集模式进行样品中的宿主蛋白分析（HCPs），可以全面、准确定量分析的同时获得MSMS信息，一次进样即可完成任意数量HCPs的定量分析工作，并在30分钟的LC梯度内，完成ppm级HCPs的含量测定。SWATH和TAP技术联合使用确定蛋白复合体的成分是SWATH技术最常用的应用之一，金开瑞生物高精度质谱平台，开发了一套从实验到生物信息分析的AP-SWATH流程，采用TAP技术将目标靶蛋白的相互作用蛋白特异性富集，然后结合具有高灵敏度、高准确度、高通
