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- 2025年07月14日
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技术流程
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ Tribrid™
技术优势
· 富集效率高，可提高修饰肽段检测效率
· 基于高精度的质谱分析，对修饰位点精确鉴定
· 大规模的蛋白质组修饰位点的鉴定与分析
应用领域
· 翻译后修饰位点的定性分析
· 定量磷酸化蛋白质分析
· 糖基化：位点分析和糖基化相对含量分析
· 乙酰化：乙酰化的定性和定量分析
参考文献
Ramirez-Correa, G.A., et al. (2014) Targeted proteomics of myofilament phosphorylation and other protein posttranslational modifications. Proteomics. Clinical applications 8, 543-553
蛋白翻译后修饰送样要求
| 样本 | 样品要求 |
蛋白样本 |
每组样品300µg 蛋白质，重复的话翻倍，一般建议客户准备两份样品备用。 |
组织样本 |
按照蛋白质组织提取效率（蛋白：组织=7%），考虑提取后续验证研究样本方便，建议0.1g 左右或更多组织。 |
细胞样本 |
107个细胞，胰酶消化，按细胞冻存标准离心收集细胞即可。 |
体液样本 |
血清 200µL以上，脑脊液200µL 以上，尿液1mL ，泪液 1mL. |
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文献和实验蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications，PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解，几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此，识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章，关于翻译后修饰Post
1.氨基端和羧基端的修饰 在原核生物中几乎所有蛋白质都是从N-甲酰蛋氨酸开始，真核生物从蛋氨酸开始。甲酰基经酶水介而除去，蛋氨酸或者氨基端的一些氨基酸残基常由氨肽酶催化而水介除去。包括除去信号肽序列。因此，成熟的蛋白质分子N-端没有甲酰基，或没有蛋氨酸。同时，某些蛋白质分子氨基端要进行乙酰化在羧基端也要进行修饰。 2.共价修饰 许多的蛋白质可以进行不同的类型化学基团的共价修饰，修饰后可以表现为激活状态，也可以表现为失活状态。 （1）磷酸化： 磷酸化
O-GlycBase - O-glycosylated proteins db PhosphoBase - Phosphorylation sites db RESID - Db of Amino Acid Modifications
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