UNIQ-10柱式PAGE胶DNA回收试剂盒

PCR产物回收、纯化

一、实验目的 学习使用DNA胶回收试剂盒回收、纯化琼脂糖凝胶中的DNA片段，掌握回收、纯化原理和实验操作。 二、基本原理 DNA片段的回收和纯化是基因工程操作中的一项重要技术，例如可收集特定酶切片段用于克隆或制备探针，回收PCR产物用于再次鉴定等。纯度和回收率是回收实验中两个最重要的技术指标：前者未达标时会严重影响以后的酶切、连接、标记等酶参与的反应；后者不理想时往往会大大增加前期的工作量。

分离纯化DNA片段中的污染物方法和原理

DNA;低盐、高pH值情况下释放DNA。离心柱上含有Resin合成树脂，具有吸附DNA的功能)，配备设计独特的离心吸附柱式结构，使用常规台式高速离心机 ，在几分钟之内即可以高效回收核酸片段。 三、 仪器与试剂 实验仪器 1、琼脂糖凝胶电泳系统 2、紫外观察分析仪 3、离心机 4、单面刀片 5、恒温水浴锅 试剂 1、 DNA回收试剂盒 溶胶液：6 M NaClO 4 (pH 5.2

PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接)

原理】 1.DNA片段回收方法：DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中，通上一定电压进行电泳，不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶，用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶作用下，可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点，可用于PCR产物的克隆和测序。