- ¥1850 - 3980
- 美国ATCC
- YB-ATCC-5769
- 美国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
钰博生物
- 细胞类型：
复苏
- ATCC Number：
详见官方网站
- 组织来源：
见说明书
- 物种来源：
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型：
请咨询销售人员
- 细胞形态：
上皮样；多角形
- 是否是肿瘤细胞：
见说明书
- 器官来源：
见说明书
- 运输方式：
干冰运输or活细胞运输
- 年限：
见说明书
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
1ml/株
稳定转染细胞株的构建
原理：
稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。
L5178Y细胞,ATCC细胞应用：
观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究）
一般流程：
1） 筛选浓度测定：以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2） 细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3） 细胞转染（病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6）
4） 利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5） 鉴定筛选结果
L5178Y细胞,ATCC细胞前期需要准备：
l 构建好的外源基因载体
l 待转染的细胞系（1×106个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）以及细胞培养条件的说明
l 若需要检测靶基因的表达变化，请提供相应抗体
L5178Y细胞,ATCC细胞结果呈现：
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析
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YB-ATCC-5111 人结肠癌细胞,SW480细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-5112 人结肠癌细胞,SW403细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-5113 人结肠癌细胞,SW1116细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-5114 人结肠癌细胞,RKO细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-5115 人结肠癌细胞,Ls-174-T细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-5116 人结肠癌细胞,LS174T细胞 进口美国ATCC细胞株，1ml/株
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文献和实验6）亦可。细胞在使用前应进行有无支原体污染的检查。 培养液：应根据试验所用系统和细胞类型来选择适宜的培养基。对于 V79和 CHO 细胞，常用最-低必需培养基（MEM，Eagle）、改良 Eagle培养基（DMEM）加人10%胎牛血清和适量抗菌素。对于 TK6 和 L5178Y细胞，常用 RPMI 1640培养液，加人10%马血清（培养瓶培养）或20%马血清（96孔板培养）和适量抗菌素（青霉素、链霉素）。 胰蛋白酶/EDTA溶液：用无钙、镁 PBS配制，胰酶的浓度为0.05 %，EDTA 的浓度
细胞培养基成分复杂，包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异，这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖，有时也会使用半乳糖代替，这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸（尤其是 L - 谷氨酰胺）和丙酮酸盐也可作为碳源。除了营养成分，培养基也会帮助维持培养体系的 pH 和渗透压。pH 的维持依靠一种或多种缓冲液体系，最常见的包括 CO2/NaHCO3、磷酸盐和 HEPES 等，血清也可以作为完全培养基的缓冲液（文章末尾会送
性突变，故细胞不能存活。若 TK 基因发生突变，导致胸苷激酶缺陷，则 TFT 不能磷酸化，亦不能掺 DNA，故突变细胞在含有 TFT 的培养基中能够生长，即表现出对 TFT 的抗性。根据突变集落形成数可计算突变频率，从而推断受试物的致突变性。在 TK 基因突变试验结果观察中可发现两类明显不同集落，即大/小集落（L5178Y 细胞）或正常生长/缓慢生长集落（TK6 细胞），有研究表明，大集落/正常生长集落主要由点突变或较小范围的缺失等引起，而小集落/缓慢生长集落主要由较大范围的染色体畸变，或由涉及调控
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