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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
稳定转染细胞株的构建
原理:
稳定转染,就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。
MSTO-211H细胞,ATCC细胞应用:
观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(稳定,可长期进行研究)
一般流程:
1) 筛选浓度测定:以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2) 细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3) 细胞转染(病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6)
4) 利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5) 鉴定筛选结果
MSTO-211H细胞,ATCC细胞前期需要准备:
l 构建好的外源基因载体
l 待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明
l 若需要检测靶基因的表达变化,请提供相应抗体
MSTO-211H细胞,ATCC细胞结果呈现:
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析
YB-ATCC-4679 人胰腺细胞,AR42J细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4680 人胰腺导管腺癌细胞,PL45细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4681 人胰腺癌细胞系 SW 1990细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4682 人胰腺癌细胞,SFPAC-1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4683 人胰腺癌细胞,PSN1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4684 人胰腺癌细胞,PC-3细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4685 人胰腺癌细胞,PC-2细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4686 人胰腺癌细胞,Patu 8988细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4687 人胰腺癌细胞,PANC-1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4688 人胰腺癌细胞,Panc 10.05细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4689 人胰腺癌细胞,MIApaca-2细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4690 人胰腺癌细胞,KP4细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4691 人胰腺癌细胞,KP3细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4692 人胰腺癌细胞,KP2细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4693 人胰腺癌细胞,KP1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
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文献和实验一、材料和仪器 1. 海拉细胞(ATCC#CCL-2)2. 96孔聚苯乙烯板(Fisher#07-200-91;Corning#3598)3. MTT细胞增殖试剂盒(ATCC#30-1010K)4. 胶原I(Sigma-Aldrich#C7661)5. 密理博(D-MEM)高糖培养基DMEM(Invitrogen#10313-021)6. 胎牛血清(ATCC#30-2020)7. 0.5 M EDTAsolution8. 牛血清蛋白(Invitrogen#15561
1(B220抗体;ATCC号TIB146)、GK1.5(CD4抗体;ATCC号TIB207)、3.155(CD8抗体;ATCC号TIB211)、M5/114(MHCⅡ抗体;ATCC号TIB120) 6. 兔补体(Pel-Freez) 7. RPMI-5完全培养基 8. 小鼠GM-CSF(mGM-CSF):可以来源于纯化的重组蛋白,也可来源于转染小鼠GM-CSF基因的细胞系的条件培养基 9. 用于流式细胞检测DC的抗体:如MHCⅡ类分子的杂交
3.2 加温对支原体污染的治疗效果:经观察发现,加温8h后,荧光小点开始变少。16h细胞周围支原体几乎消失。进入24h开始细胞周围的荧光小点完全消失,但细胞开始逐渐变圆。脱落飞48h大部分细胞已完全变圆,细胞正常形态消失,培养基中出现飘浮死亡细胞。 3.3 多西环素、环丙沙星联合治疗支原体的效果:30μg/ml组和50μg/ml组多西环素和环丙沙星作用细胞24h开始,荧
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