用TruePrep® DNA Library Prep Kit V2 for Illumina(Vazyme #TD501)构建DNA文库。文库初始大小为200-1500 bp,用VAHTS® DNA Clean Beads按下表的条件对PCR产物进行分选,得到不同大小的文库,用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析。
2.DNA文库构建,与AMPure XP Beads比较
以50ng human DNA为起始模板,用TruePrep® DNA Library Prep Kit V2 for Illumina(Vazyme #TD501)构建文库。分别用VAHTS® DNA Clean Beads和AMPure XP Beads按相同条件分选平均长度约为470,570,670的文库(对应的insert size为350,450,550bp),用Agilent2100 Bioanalyzer进行分析。
3.RNA文库构建,与AMPure XP Beads比较
以1μg或100ng Universal Human Reference RNA(UHRR)为起始模板,用TruSeq® RNA Sample Prep Kit V2(Illumina #RS-122-2001)构建RNA文库,分别用VAHTS® DNA Clean Beads和AMPure XP Beads按相同条件操作,获得平均长度约为280bp的文库(对应的insert size约为160 bp),用Agilent Bioanalyzer进行分析。
VAHTS® DNA Clean Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,适合于高通量测序文库构建中DNA纯化与片段大小分选。VAHTS® DNA Clean Beads兼容各品牌的DNA,RNA建库试剂盒和文献报道的建库流程,和目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式完全相同,文库的产量、大小分布与AMPure XP Beads高度一致,因此可以无缝替代AMPure XP Beads,有效降低您的建库成本。