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- 见说明书
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- KL-E12486
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 检测范围：
见说明书
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 标记物：
见说明书
- 样本：
血清/组织/尿液
- 规格：
96T/48T
英文学名：Rat plasma α granule membrane protein (GMP-140) ELISA kit
科研名称：大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒说明书
实验名称：大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)检测试剂盒
大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒问：间接法检测抗体，大体过程如下：
包被（4度过夜），PBST洗涤，封闭(5%脱脂奶粉)，洗涤，加入一抗，洗涤，加入二抗，洗涤，我设置的阴性对照就是第一步直接在孔中加100ul 包被液，没有加我的蛋白，照理说，没有蛋白最后就不应该显色，怀疑是二抗没洗涤干净所以才显色，洗涤了至少5次以上，最后还在纸上使劲拍干，但是最后还是显色，求高人指点~~（包被液是碳酸盐缓冲液，稀释液assay buffer: PBS：KH2PO4,Na2HPO4.12H2O,NaCL,KCL,Tween-20，我的一抗二抗都是用这个稀释液配的，封闭液也是用稀释液配的脱脂奶粉，没有血清啊）
大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒答：
1.可能封闭效果不好
2可能封闭液脱脂奶粉可以和一抗交叉反应
3.一抗没有洗涤干净
4.加样时操作出现错误。
大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒先确定封闭有没有问题，洗的话二抗确实多洗几遍没错，没有洗板机，每次洗可以摇晃板子，每遍1-2分钟，也可以多设置几个阴性孔，观察结果，看是不是没洗干净的问题。加样尽量加到底部，避免沾壁！
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文献和实验:leukocyte adhesion molecule,白细胞粘附分子 GMP-140：granule membrane protein-140,颗粒膜蛋白-140 PADGEM：platelet activation-dependent granule external membrane,血小板活化 依赖性颗粒外膜 ELAM-1：endothelial leukocyte adhesion molecule-1,内皮细胞白细胞
0.3ml enzyme (alkaline phosphatase, Sigma type VII, sp act. 1,140 U/ml) at 8,000 x g for 2 mins. 2. Add to the pellet 0.1 ml specific antibody (animal specific, pathogen specific) affinity purified, resulting in a 3:1 ratio of enzyme to antibody.
（ALIX）、肿瘤易感基因 101 蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。其中 CD9、CD63、HSP70、TSG101 是外泌体常用的鉴定蛋白。 流式细胞术检测：外泌体可以先进行荧光标记，再通过流式细胞仪检测外泌体表面标记蛋白。但是传统的流式细胞仪检测样本的颗粒大小是 300-500 nm，而外泌体直接都在 300 nm 以下，因此，可能大量的外泌体检测不到，造成分析不太准确。 ELISA 检测 ：根据外泌体的表面标志物，如 CD9、CD63 进行
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