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文献和实验图 1 实验流程与常见问题索引 Q1:染色结果呈阴性,是怎么回事? (1)抗体来源选择错误:本试剂盒二抗为抗兔/鼠,请确保一抗来源的种属为兔源或鼠源。 (2)组织切片本身不存在目的蛋白:可通过 The Human Protein Atlas 数据库或 UniProt数据库查询目的蛋白在细胞或组织中的表达情况。 (3)抗体浓度和质量问题:提高抗体工作浓度或延长孵育时间;确认抗体可进行IHC实验,通过非IHC实验排除抗体质量问题。 (4)脱蜡不完全:可根据切片上是否存在透明颗粒,判断是否存在脱蜡
磁珠法通用型RNA提取试剂盒实测:动物组织样本的高效提取方案
做分子实验都清楚,RNA提取虽是基础操作,结果却常常充满不确定性。尤其是动物组织样本,肝脏、肌肉、脑、脾脏等不同组织在质地、内源酶含量、脂肪比例上差异显著,稍有不慎便导致RNA降解或纯度不足。许多实验室不得不针对不同组织备上多种试剂盒,既占用空间又容易混淆,一旦遇到珍贵样本提取失败,着实影响实验进度。 今天我们使用上海领骏生物新推出的磁珠法通用型RNA提取试剂盒对动物组织进行提取,使用的仪器为LJbio32H自动核酸提取纯化仪,以下为实验结果: 序号 样本 260/280
后小心弃去乙醇(为了更好地控制RNA中的盐离子含量,应尽量除净乙醇)。5. RNA的溶解。 室温干燥沉淀2~5分钟(不可以离心或加热干燥,否则R N A 将会很难溶解, 有关R N A 溶解可以参考Troubleshooting中的相关说明),加入适量的RNasefree水溶解沉淀,必要时可用移液枪轻轻吹打沉淀,待RNA沉淀完全溶解后于-80℃保存。 RNA提取操作流程简图 FAQs [Q1] 一般情况下每毫克的组织或1×106个细胞中所能提取的RNA量如下表: [Q2] 有关RNA
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