- ￥2570 - 3220
- Sino Biological
- 北京
- 11314-H20B1
- 2026年01月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Recombinant Human EphA4 / HEK8 Protein (aa 570-986, His & GST Tag)
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
20.00 µg/50.00 µg
| 规格： | 20.00 µg | 产品价格： | ￥2570.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50.00 µg | 产品价格： | ￥3220.0 |
蛋白名称：Human EphA4 / HEK8 Protein (aa 570-986, His & GST Tag)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the human EPHA4 (P54764) (Ser570-Val986) was fused with the N-terminal polyhistidine-tagged GST tag at the N-terminus.
表达宿主：Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度：> 90 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性：1. The specific activity was determined to be 17 nmol/min/mg using Poly(Glu:Tyr) 4:1 as substrate. 2. Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized human EPHA4 (aa 570-986) (Cat: 11314-H20B1) at 10 μg/ml (100 μl/well) can bind biotinylated human EphrinA5-His with a linear range of 0.625-5.0 μg/ml.
蛋白内毒素：< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端：Met
蛋白分子量：The recombinant human EPHA4 /GST chimera consists of 654 amino acids and has a calculated molecular mass of 75 kDa. The recombinant protein migrates as an approximately 67 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号：P54764
蛋白氨基酸序列：Ser570-Val986
蛋白标签：N-GST & His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验载体克隆到腺病毒载体 -- 0-15天 4天 获得重组腺病毒 14-21天 17-22天 4-7天 噬斑纯化 5-10天 0-5天 -- 总计 26-45天 24-56天 10-17天 以体外连接方法为基础 (by Mizuguchi和Kay)，CLONTECH的Adeno-X™表达系统提供了一种快速、高效构建重组腺病毒的方法。只需4至7天就可以获得重组腺病毒，如图1所示。由于经过7天的培养之后HEK 293细胞会渐渐失去对培养皿的附着而扩散，导致噬斑融合，用传统方法制备重组腺病毒往往需要铺平
)。然后从细菌中收集重组腺病毒，用其感染HEK 293细胞。虽然这些方法是可行的，但由于在HEK 293细胞中同源重组率偏低；或在转化BJ 5183之前克隆步骤过于复杂，使这两种方法效率偏低(下表)。同源重组体外连接法Viral DNAPlasmid-based制备穿梭载体和腺病毒载体7-14天7-14天2-3天目的基因从穿梭载体克隆到腺病毒载体--0-15天4天获得重组腺病毒14-21天17-22天4-7天噬斑纯化5-10天0-5天--总计26-45天24-56天10-17天以体外连接方法为基础
过程： 1. 铺细胞： 选择状态良好的293T细胞传代， 2-3x105个细胞/35mm dish。 2. 20-24h后，待细胞长至铺满瓶底约50-70%的时候，进行转染。下面就35mm dish为例，采用以下转染体系： ddw： 105ul plasmid： 2 ug （如0.5ug/ul， 即用4ul） 2M CaCl2： 16.5ul 2XHBS： 125ul 按上述顺序，往eppendorf管中依次加入上述四种试剂。 先将前三者混匀， 最后加2XHBS。 一种
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