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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
稳定转染细胞株的构建
原理:
稳定转染,就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。
Cyc-Tag(S49)细胞,ATCC细胞应用:
观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(稳定,可长期进行研究)
一般流程:
1) 筛选浓度测定:以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2) 细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3) 细胞转染(病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6)
4) 利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5) 鉴定筛选结果
Cyc-Tag(S49)细胞,ATCC细胞前期需要准备:
l 构建好的外源基因载体
l 待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明
l 若需要检测靶基因的表达变化,请提供相应抗体
Cyc-Tag(S49)细胞,ATCC细胞结果呈现:
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析
YB-ATCC-5306 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 PG-LH7细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5307 人肺巨细胞癌 PG细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5308 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5309 人肺成纤维样细胞,HLF细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5310 人肺成纤维细胞,HFL1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5311 人肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5312 人肺癌亚历山大细胞系 PLC/PRF/5细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5313 人肺癌细胞株 MSTO-211H细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5314 人肺癌细胞系(未分化)Calu-6细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5315 人肺癌细胞系 Tul-1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5316 人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-5317 人肺癌细胞,PC9细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
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文献和实验质,小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时,通过洗杂步骤,即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质,通过改变缓冲液的条件,如pH,或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢?仅达到所需的质量量级,如毫克级(或克级)即可满足吗? 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要,比如,就蛋白的生物活性和纯度而言,通常会有所要求。 以下我们来讨论并且比较2种技术: His-tag系统和Strep-tag®系统,都使用了亲和层析法来纯化
1. CUT&Tag 适用于什么物种?如果需要做植物 CUT&Tag ,需要怎么操作? CUT&Tag 适用于哺乳动物细胞的蛋白-DNA 互作研究,酵母、植物等细胞需要经过(破除细胞壁或者提取细胞核)来进行实验。CUT&Tag 在哺乳动物细胞系上的应用比较成熟,动物组织经过处理得到悬浮单个细胞同样可以进行实验。植物进行 CUT&Tag 操作可以参照 Low-input chromatin profiling in Arabidopsis
CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)【1】是一种研究蛋白质-DNA 相互作用的新技术。与传统的染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)相比,CUT&Tag 具有信噪比高、可重复性好、实验周期短(1 天实现从细胞到文库构建)、细胞投入量低等显著优势。该方法一经问世,便受到广大科研工作者的青睐。 在过去的一年时间里,科研工作者在动物、植物细胞中成功应用 CUT&Tag
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