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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
稳定转染细胞株的构建
原理:
稳定转染,就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。
HuTu-80细胞,ATCC细胞应用:
观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(稳定,可长期进行研究)
一般流程:
1) 筛选浓度测定:以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2) 细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3) 细胞转染(病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6)
4) 利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5) 鉴定筛选结果
HuTu-80细胞,ATCC细胞前期需要准备:
l 构建好的外源基因载体
l 待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明
l 若需要检测靶基因的表达变化,请提供相应抗体
HuTu-80细胞,ATCC细胞结果呈现:
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析
YB-ATCC-4426 小鼠胚胎肝细胞,BNL CL.2细胞, 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4427 小鼠胚胎干细胞瘤细胞,P19细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4428 小鼠胚胎干细胞,CmESCs-11细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4429 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) NIH-3T3-L1细胞, 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4430 小鼠胚胎成纤维细胞,T6-Swiss albino细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4431 小鼠胚胎成纤维细胞,SK-MEL-1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4432 小鼠胚胎成纤维细胞,Psi2 DAP细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4433 小鼠胚胎成纤维细胞,PA12细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4434 小鼠胚胎成纤维细胞,NIH3T3细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4435 小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4436 小鼠胚胎成纤维细胞,MC3T3-L1细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4437 小鼠胚胎成纤维细胞,C3H/10T1/2细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-4438 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3clone A31细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
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文献和实验mahaizhi 各位前辈,请教一下在国内能不能购买到ATCC的原装细胞,有没有哪家公司或者什么机构是ATCC在国内的指定代理。如果有的话,请不吝赐教联系方式。谢谢。 ddh382 我也想知道 veimojie ATCC 在中国的总代理是北京中原公司 比较放心 都是ATCC原装干冰包装发给客户 有兴趣可以去公司主页看看 网址http://www.sinozhongyuan.com/index
。 4、低温原则 所取样本离体后,应尽快置于干冰或 -80℃ 冰箱中,并保证在实验前始终处于 -70℃ 以下, 以避免外泌体降解。 二、样本制备指南 1、细胞上清 1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,贴壁细胞密度在 70%-80%,悬浮细胞密度在 60%-70%; 2) 对于贴壁细胞,去除原有培养基,加入适量的 PBS 缓冲液冲洗一次,彻底去除血清;对于悬浮细胞,300 g ,4℃,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 h, 根据细胞
,小心收集上清液(血清),立即进行测定。建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存,避免反复冻融。 在收集血液样本的过程中应避免溶血,因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质,这种情况下,ELISA实验中将会出现非特异性显色反应,导致检测结果不准确。另外,样本还应避免细菌污染,因为细菌可能含有内源性HRP,也会导致检测结果不准确。 血浆 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,2-8℃下以1000×g离心15分钟,小心收集上清液(血浆)。建议在-20℃或-80
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