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人羰基化蛋白(PC)ELISA检测试剂盒

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  • 上海
  • QY-H10330
  • 2025年07月16日
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      625

    • 供应商

      齐一生物科技(上海)有限公司

    • 检测范围

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    • 检测方法

      ELISA酶联免疫法

    • 应用

      科研检测

    • 适应物种

    • 标记物

      见说明

    • 样本

      血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等

    • 规格

      48

    人羰基化蛋白(PC)ELISA检测试剂盒齐一生物科技(上海)有限公司产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域.客户遍布国内各大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位.齐一生物科技(上海)有限公司客服热线:021-60348496.Web:www.qiyibio.com
    试剂盒名称:人羰基化蛋白(PC)ELISA检测试剂盒
    规 格:48T/96T
    品牌:进口原装/分装/国产
    产品的用途:仅供科研究使用!
    价格:电议400-991-0197,咨询在线客服QQ741653262,或者以邮件形式发到我司邮箱qysw@qiyibio.com。齐一生物科技(上海)有限公司提供大量品牌进口原装、以及稳定性强的国产ELISA试剂盒,性价比极高欢迎您前来选购!
    操作步骤
    实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
    1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
    为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
    2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
    3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
    4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
    5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
    6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
    7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
    8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
    注:
    1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
    2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液。测量时先用此孔调OD值至零。
    3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
    4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
    5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
    洗板方法
    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
    自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
    计算
    以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
    注意事项
    1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
    2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
    3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
    5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
    6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
    7. 底物请避光保存。
    8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
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