十二烷基硫酸钠

十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS―PAGE)

十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS ― PAGE) 第二相聚丙烯胺 胺凝胶的选择主要取决于需要分离蛋白质的相对分子质量的范围，这与单相的聚丙烯酰胺凝胶电泳的选择是相同的。当蛋白质相对分子质量在15 000～200 000时，电泳迁移率与相对分子质量的对数呈线性关系。SDS―PAGE不仅可分离蛋白质，且可在一定范围内粗略测定蛋白质的相对分子质量。其主要步骤如下。 (1)凝胶配制及灌胶：胶浓度越高，所分离蛋白质的相对分子质量范围也越大。薄的胶，其染色和脱色快，且背景

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷，消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R')的大小完全取决于分子量的高低，因此可从已知分子量的标准蛋白的对数和相对迁移率所作的标准曲线中求出供试品的分子量。 1.仪器装置 同聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2.试剂 (1)丙烯酰胺液溶 称取丙烯酰胺22.2g与双丙烯酰胺0.6g

蛋白酶PARP的测定检测细胞凋亡

89kD的裂解片断以及113kD完整的PARP蛋白， 以作为细胞凋亡早期的标志物。可检测3x105 凋亡细胞的PARP裂解片断。 【操作方法】 （1） 准备凋亡细胞的粗提物: 105 ~107 个细胞与尿素，2-巯基已醇（2-mercaptoethanol）和十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate， SDS）孵育或以超声波等方法诱导细胞凋亡后， 加入提取缓冲液，室温作用15分钟， 65℃15分钟； （2） 从凋亡细胞粗提物中