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文献和实验链霉菌抗生物素蛋白―过氧化物酶法 ABC法虽然是一种很好的方法,但是在实际应用过程中.确实也存在许多问题,如亲和 素中含有约?%的糖类,它可与组织中含糖基的物质起反应,造成背景着色。亲和素的等电 点约为10左右。可带较多的负电荷,纤维组织可带较多的正电荷,这两种电荷可互相吸引,造成背景着色。亲和素中有4个结合点,其中一半与连接抗体结合,另一半与复合物结合,如此可降低其敏感性。 为解决和克服存在的问题,20世纪90年代初提出了用链霉亲和素(streptavidin)替代ABC
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。 按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法);按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法和亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生
链霉菌属远青链霉菌( Streptomyces azureus)及夏威夷链霉菌( S. hawaiiensis)产生的抗生物质。分子量约 1600,亦称为藓霉素( Bryamycin)或硫活素( Thiactin)。与其类似的抗生物质,有硫肽菌素( Thiopeptin)、盐屋霉素 A( Siomycin A)和孢囊霉素(即可变菌素)( Sporangiomycin)等。能抑制细菌蛋白质的合成。可作用于核糖体 50S亚单位,阻碍蛋白质活体合成延长因子 EF- Tu以及 EF-
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