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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
细胞冻存及复苏的基本原则是“慢冻快融”,这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多用甘油或二甲基亚砜(DMSO)作为保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性;缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少冰晶对细胞的物理损伤。复苏细胞采用快速融化的方法可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
MCF 10A细胞,ATCC细胞;简称:MCF 10A,别名:MCF 10A细胞,ATCC细胞
MCF 10A细胞,ATCC细胞冻存操作要点:
1、细胞冻存前12~24h,换新鲜培养基,使细胞一直处于对数生长期。
2、待细胞长至80%汇合时胰酶消化,用新鲜培养基吹打后制成细胞悬液,1000rpm离心10min。悬浮细胞则直接离心。
3、弃上清,加入冻存液重悬细胞沉淀,调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL。将细胞悬液分至冻存管内,每管1~1.5mL,拧紧盖子。在管壁上做好标记,标明细胞名称、冻存日期等。(细胞冻存液配方可为胎牛血清:培养基:DMSO=4:6:1或胎牛血清:培养基:DMSO=1:9:MCF 10A细胞,ATCC细胞1或胎牛血清:DMSO=9:1,可根据各实验室实际条件调整)
4、按下列顺序依次降温:室温→4℃ 20min →-20℃ 30min →-80℃过夜→液氮保存。也可使用程序降温盒更为方便,细胞冻存管放入程序降温盒内可直接放入-80℃过夜,再转至液氮罐内。注意程序降温盒内异丙醇的量必须高于最低刻度线;冻存5次后异丙醇需要跟换一次,以免影响冻存效果。
5、细胞冻存后应取出一管复苏,检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存,为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养,观察细胞生长情况,再继续冻存。
MCF 10A细胞,ATCC细胞到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
YB-ATCC-3276 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3277 胚肺细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3278 胚肺细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3279 胚肺细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3280 胚肺细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3281 B淋巴细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3282 肝细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3283 张氏肝细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3284 小肝细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3285 羊膜细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
YB-ATCC-3286 Ad5DNA转化的胚肾细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
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文献和实验我正在培养MCF-7细胞,在此介绍一下我给细胞传代的经验:细胞放在显微镜下观察,细胞无污染、退缩,等其长满培养瓶约70%-80%时即可进行传代操作,具体步骤如下:1、 打开瓶盖,弃上清,2.D-HANK‘S夜(以50ml培养瓶为例,下同)2、吸管清洗后弃之;3、加0.25%胰酶2吸管;4、轻摇晃后置入37度温箱;5、3-5分钟后置显微镜下观察,见细胞胞质退缩,变圆;6、吸去胰酶,加含10%FCS的RPMI1640 3吸管;7、用洗管吹打,见细胞脱落,培养液变混,即可吸出加到新的培养瓶中。注意
培养条件:RPMI-1640培养液,10%(胎牛或小牛)血清,5%CO2,37度饱和湿度孵箱培养。细胞生长状态:上皮样贴壁生长。传代:细胞长满95%->弃培养液->0.25%胰酶消化2min->弃掉胰酶->加入培养液吹打贴壁细胞,将细胞悬液分瓶传代。若一传二,则3天长满;若一传三,则需要4-5天长满。
The mechanism of neogambogic acid-induced apoptosis in human MCF-7 cells
Acta Biochim Biophys Sin-2011-Wang-698-702.pdf 文章原文
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